泰３６８ 山医学院学报 ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＴＡＩＳＨＡＮ ＭＥＤＩＣＡＬ ＣＯＬＬＥＧＥ Ｖｏ１．３６ Ｎｏ．４ ２０１５ ＭＡＬ蛋白在乳腺癌中表达的研究 常 军 （泰山医学院附属医院肿瘤科，山东泰安２７１０００） 摘要：目的 研究ＭＡＬ在乳腺癌组织中的表达，探讨其与乳腺癌发病的关系，为临床的早期诊断和预后判断 提供参考。方法 应用免疫组化法检测ＭＡＬ蛋白、ＥＲ（雌激素受体）、ＰＲ（孕激素受体）及Ｃ—ｅｒｂＢ２在乳腺癌组织 中的表达情况，分析ＭＡＬ蛋白和ＥＲ、ＰＲ、Ｃ—ｅｒｂＢ２之间的相关性。结果 ＭＡＬ在乳腺癌组织中阳性表达率为 ２６．６７％（１６／６０）；对照组织中阳性表达率为７８．３３％（４７／６０），二者比较有显著统计学差异（Ｐ＜０．０５）。乳腺癌组 织中ＥＲ与ＭＡＬ阳性率比较具有统计学差异性（Ｐ＜０．０５），ＰＲ与ＭＡＬ阳性率比较具有统计学差异性（Ｐ＜０．０５）， Ｃ～ｅｒｂＢ２与ＭＡＬ阳性率比较具有统计学差异性（Ｐ＜０．０５）。结论 ＭＡＬ在乳腺癌组织中的表达水平明显降低， 表明ＭＡＬ与肿瘤发生有关。ＭＡＬ在乳腺癌组织中的表达与ＣｅｒｂＢ一２呈负相关。 关键词：ＭＡＬ蛋白；乳腺癌；ＥＲ、ＰＲ、Ｃ—ｅｒｂＢ２ 中图分类号：Ｒ７３０文献标识码：Ａ文章编号：１００４—７１１５（２０１５）０４－０３６８－０３ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４—７１ １５．２０１５．０４．００３ Ｔｈｅ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＭＡＬ ｉｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ Ａｂｓｔｒａｃｔ ＣＨＡＮＧ Ｊｕｎ （Ｔｈｅ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆＴａｉｓｈａｎ Ｍｅｄｉｃａｌ ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｔａｉａｎ ２７１０００，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＭＡＬ ｉｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ＭＡＬ ａｎｄ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ，ｗｈｅｔｈｅｒ ｉｔ ｂｅ ａｓ ａｎ ｅａｒｌｙ ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ｍａｒｋｅｒ ｆｏｒ ｅａｒｌｙ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ： ＭＡＬ，ＥＲ（ｅｓｔｒｏｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ），ＰＲ（ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ），Ｃ—ｅｒｂＢ２（ｃａｎｃｅｒ ｇｅｎｅｓ）ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ＳＰ ｉｍ— ｍｕｎｏｈｉｓｔｏｅｈｅｍｉｃａｌ ａｓｓａｙ ｉｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ．Ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ＭＡＬ．ＥＲ．ＰＲ ａｎｄ Ｃ—ｅｒｂＢ ｉＳ ｕｓｅｄ ｂｙ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ａ— ｎａｌｙｓｉｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＭＡＬ ｉｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｗａｓ ２６．６７％（１６／６０），ｂｕｔ ｉｔ ｗａｓ ７８．３３％ （４７／６０）ｉｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｗｏ ｇｒｏｕｐｓ．Ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｏｆ ＭＡＬ ａｎｄ ＥＲ．ＰＲ ｏｒ Ｃ—ｅｒｂＢ２ ｉｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＭＡＬ ｉｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｔｉｓ— ｓｕｅｓ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ，ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｔｕｍｏｒ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＭＡＬ ｇｅｎｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｅｏｒ－ ｒｅｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｏｆ ｂｅｔｗｅｅｎ ＭＡＬ ａｎｄ ＣｅｒｂＢ一２ ｇｅｎｅ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ＭＡＬ；Ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ；ＥＲ；ＰＲ；Ｃ—ｅｒｂＢ一２ 乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一。乳腺癌 发展尤其与多种癌基因的突变及异常表达有密切关 的流行资料显示，全世界每年约４１ １ ０００位的女性 死于乳腺癌…。雌激素受体（ｅｓｔｒｏｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ， 系，单一基因常难以确定乳腺癌临床生物学行为。 ＭＡＬ基因于１９８７年由Ａｌｏｎｓｏ 等人首先发现， ＥＲ）、孕激素受体（ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＰＲ）测定，Ｃ —ＭＡＬ基因的ｃＤＮＡ克隆呈现在成熟的Ｔ淋巴细胞 上，属于肿瘤抑癌基因的一类，ＭＡＬ基因的缺失和 ｅｒｂＢ２（ｈｕｍａｎ ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ一２） 蛋白的检测已普遍应用，其阳性表达与癌细胞的耐 药和预后有关，Ｃ—ｅｒｂＢ２阳性患者的曲妥珠单抗治 疗已经广泛应用于临床，ＥＲ、ＰＲ状况更是选择是否 进行内分泌治疗的重要指标。但是乳腺癌的发生、 肿瘤的发病、复发和转移具有一定的相关性。该课 题研究ＭＡＬ基因在乳腺癌组织中的表达，探讨其与 乳腺癌的关系。 作者简介：常军（１９６４一），男，山东泰安人，主治医师，本科，主要从事－临床肿瘤内科工作。 泰山医学院学报 ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＴＡＩＳＨＡＮ ＭＥＤＩＣＡＬ ＣＯＬＬＥＧＥ Ｖ０ｌ＿３６ Ｎｏ．４ ２０１５ 细胞数＞５０％。 １材料与方法 Ｃ—ｅｒｂＢ２参照ＦＤＡ推荐的ＨｅｒｃｅｐＴｅｓｔ评分标 １．１病历资料和试剂 准 Ｊ：（一）所选镜下区域中阳性细胞数为少于１０％ 本研究中的乳腺癌组织标本取自泰山医学院附 的癌细胞胞膜染色；（＋）所选镜下区域中阳性细胞 属医院２０１０年１月至２０１４年ｌ２月的乳腺癌病例， 数１０～２５％癌细胞胞膜呈棕黄色染色，染色间断分 总共６０例，对照组乳腺组织标本取自同期病理诊断 布；（２＋）所选镜下区域中阳性细胞数２６％～５０％ 乳腺增生病例。患者均为女性最小年龄为２４岁，最 癌细胞胞膜呈棕黄色染色，包膜染色连续，环绕整个 大年龄为７４岁，平均年龄为５０岁。收集乳腺癌组 包膜；（３＋）所选镜下区域中阳性细胞数２６％一 织及癌旁正常组织蜡块。鼠抗人ＭＡＬ单克隆抗体、 ５０％癌细胞胞膜呈棕黄色染色，包膜染色连续，环绕 ＤＡＢ显色试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司； 整个包膜。 鼠抗Ｃ—ｅｒｂＢ一２单克隆抗体、鼠抗ＥＲ（ＩＤＳ，Ｋ一 ＭＡＬ主要定位于细胞膜，每例随机选取ｌＯ个 ０２４１）及ＰＲ（ＩＡ６，Ｋ一０４４８）单克隆抗体均购自上海 高倍视野，每个视野计数１００个细胞，（不足１０个高 生工生物工程技术服务有限公司。 倍视野计数全部细胞）以此计算阳性细胞数，根据 １．２方法 阳性染色细胞数判断结果：阴性（一）：无阳性细胞 １．２．１制备石蜡切片 将蜡块制成约４ Ｉｘｍ厚的 或阳性细胞数少于、等于５％；弱阳性（１＋）：阳性细 病理切片，切片先行ＨＥ染色，光镜下进行形态学观 胞数大于５％且少于、等于２５％；中等强度阳性（２ 察，核对组织及病理诊断，然后在低倍镜下于癌组织 ＋）：阳性细胞数大于２５％且小于、等于５０％；强阳 丰富区域用油性笔标出目标区域。 性（３＋）：阳性细胞数大于５０％ １．２．２免疫组织化学染色采用ＳＰ法，ＳＰ（ｓｔｒｅｐ— １．２．４统计学分析应用ＳＰＳＳ１３．０统计软件进行 ｔａｖｉｄｉｎ—ｐｅｒｏｓｉｄａｓｅ）法，即链霉菌抗生物素蛋白一过 分析，计数资料差异性使用 检验，等级资料的相 氧化物酶连结法。免疫组化染色步骤如下：石蜡切 关性分析用秩和相关检验。相关性应用Ｓｐｅａｒｍａｎ 片常规脱蜡；加入过氧化物酶阻断溶液，室温下孵 相关性检验，以Ｐ＝０．０５为检验水准。 育；热修复抗原；滴加正常山羊血清，封闭非特异性 抗原；滴加适当稀释的一抗，湿盒中孵育，阴性对照 ２结果 用ＰＢＳ液替代一抗；滴加二抗，室温下湿盒内孵育； ２．１ ＭＡＬ在乳腺癌组织和癌旁组织中的阳性表达 滴加链霉菌抗生物素蛋白一过氧化物酶工作液； 情况（见表１）。 ＤＡＢ显色，光学显微镜下观察，镜下控制反应时间， 表１ ＭＡＬ在癌组织及对照组织中的表达情况 一般在５～３０ ｒａｉｎ之间，以细胞膜或细胞浆出现棕 黄色着色为显色，达最佳效果后，蒸馏水冲洗，终止 反应；苏木素复染；封片。 １．２．３结果判断ＥＲ、ＰＲ以细胞核内出现棕黄色 ＝３２．１１３６，Ｐ＝０．００００ 颗粒为阳性表达，依据阳性细胞所占的百分比将结 ＭＡＬ在癌组织及癌旁组织中的表达情况 ＝ 果分为 Ｊ：（一）所选镜下区域中阳性细胞数＜１０％ ３２．１１３６，Ｐ＝０．００００，ＭＡＬ在癌组织表达明显降低， 或者胞浆着色均为非特异染色；（＋）所选镜下区域 表明其可能与肿瘤抑制有关。 中阳性细胞数１０—２５％；（２＋）所选镜下区域中阳 ２．２ ＭＡＬ与ＥＲ、ＰＲ及Ｃ—ｅｒｂＢ一２在乳腺癌组织 性细胞数２６％～５０％；（３＋）所选镜下区域中阳性 中的表达相关性（见表２）。 表２ ＭＡＬ与ＥＲ、ＰＲ及Ｃ—ｅｒｂＢ一２在乳腺癌组织中的表达相关性 ｌ８ ７ ３ Ｏ ２８ 从表２可以看出，ＭＡＬ与ＥＲ在乳腺癌组织中 的表达等级相关系数ＦＳ＝０．８０００，Ｐ＞０．２０，表明两 泰３７０ 山医学院学报 ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＴＡＩＳＨＡＮ ＭＥＤＩＣＡＬ ＣＯＬＬＥＧＥ Ｖｏ１．３６ Ｎｏ．４ ２０１５ 者无明显相关性；ＭＡＬ与ＰＲ在乳腺癌组织中的表 乳腺癌的组织中的Ｃ—ｅｒｂＢ一２阳性表达多见于分 达等级相关系数ｒｓ＝０．２０００，Ｐ＞０．２０；ＭＡＬ与Ｃ— 化差和浸润性的类型，阳性表达率约为２０％一 ｅｒｂＢ一２在乳腺癌组织中的表达等级相关系数ｒｓ＝ 一４０％ １２ｊ。众多研究已经证实，Ｃ—ｅｒｂＢ一２在乳腺癌 ０．６０００，Ｐ＜０．０５，表明两者有明显负相关性。 论 组织中的表达为阳性的患者通常对常规化疗不敏 感，预后较差。ＭＡＬ基因作为抑癌基因在乳腺癌组 ３讨织中的低表达，可能两者具有相互的抑制作用，具体 ． 乳腺癌的发生、发展以及转移是多因素和多基 机制尚不清楚，有待于进一步的研究。 因的参与，是多步骤突变的结果，对ＥＲ、ＰＲ和Ｃ— ｅｒｂＢ一２的研究已经比较成熟，但检测单一的基因异 参考文献： 常很难确定乳腺癌的临床生物学行为。在细胞癌变 的过程中，既有原癌基因的激活，亦涉及到抑癌基因 的失活，两者是一对矛盾的统一体，相互制约，达成 一种平衡，控制着细胞的生长与分化。ＭＡＬ基因属 于抑癌基因的一类，该基因于１９８７年由Ａｌｏｎｓｏ 等 人首先发现。ＭＡＬ基因的功能包括细胞内运输、基 因表达和免疫调节等多方面。ＭＡＬ基因能抑制肿瘤 细胞的侵袭性、活性以及致肿瘤性。ＭＡＬ基因功能 之一可能是高尔基体和远端质膜之问囊泡转运和蛋 白质分选的一个功能成分 ；作为抑癌基因，ＭＡＬ 基因在多数癌组织中下调的机制尚不明确，可能与 其启动子区甲基化有关 。 Ｍｉｍｏｒｉ等 ’副研究发现ＭＡＬ基因在食管癌组织 和癌前病变组织均出现表达缺失，Ｗａｎｇ等 对 ＭＡＬ基因的检测和分析，表明ＭＡＬ基因在所有正常 食管上皮组织均有表达，ＭＡＬ基因只在８例肿瘤细 胞中有表达，两者ＭＡＬ基因的表达具有显著差异 性，我们的研究结果表明６０例乳腺癌组织中ＭＡＬ 表达阴性者４４例；正常乳腺组织仅有１３例ＭＡＬ表 达阴性，两者比较差异有显著性，表明其表达缺失 与肿瘤发生有关。Ｂｕｆｆａｒｔ等¨ 对２０２例胃癌和２２ 例正常胃黏膜组织中的ＭＡＬ基因启动子Ｍ１区以及 Ｍ２区甲基化状态进行研究，显示ＭＡＬ基因发生甲 基化率在正常胃黏膜组织和胃癌组织中具有显著差 异性。Ｈｏｍｅ等人 发现ＭＡＬ基因的启动子在早 期乳腺癌病人中普遍发生了甲基化，在没有接受辅 助化疗的患者中ＭＡＬ基因在乳腺癌组织中的表达 下降，确定ＭＡＬ基因在乳腺癌中是一种基因。 该研究发现乳腺癌组织ＭＡＬ蛋白表达水平与 ＥＲ、ＥＲ无相关性，但是Ｃ—ｅｒｂＢ一２的阳性表达和 ＭＡＬ的阳性表达具有负相关性。Ｃ—ｅｒｂＢ一２是具 有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白，能够促使细胞进 行，促进癌细胞生长，促进肿瘤的侵袭与转移。 ［１］ Ｂａｎｅｒｊｅｅ，Ｓ．Ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｓｅｃｒｅｔｅｄ ｐｌａｔｅｌｅｔ—ｄｅｒｉｖｅｄ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ—ｉｎｄｕｃｅｄ ｍｏｔｉｌｉｔｙ ｏｆ ｖａｓｃｕｌａｒ ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌｓ ｉｓ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｔｈｒｏ￣Ｉｇｈ ｎｅｕｒｏｐｉｌｉｎ一１［Ｊ］．Ｍｏｌ Ｃａｒｃｉｎｏｇ，２００６，４５（１１）：８７１— ８０． ［２］ Ａｌｏｎｓｏ ＭＡ，Ｗｅｉｓｓｍａｎ ＳＭ．ｅＤＮＡ ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ ＭＡＬ， ａ ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｓｓｏｃｉａｓｔｅｄ ｗｉｔｈ ｈｕｍａｎ Ｔ— ｃｅｌｌ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａ— ｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，１９８７，８４（７）：１９９７—２００１． ［３］Ｗｉｔｔｌｉｆｆ，Ｊ．Ｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｓｉｇｎａｔｕｒｅｓ ｏｆ ｅｓｔｒｏｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ—ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｇｅｎｅｓ ｉｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｐｒｅｄｉｃｔ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｏｕｔｃｏｍｅ［Ｊ］．Ａｄｖ Ｅｘｐ Ｍｅｄ Ｂｉｏｌ，２００８，６１７：３４９—３５７． ［４］Ｅｌｌｉｓ，Ｉ．Ｏ．Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ＨＥＲ２ ｔｅｓｔｉｎｇ ｉｎ ｔｈｅ ＵＫ［Ｊ］．ｊ Ｃｌｉｎ Ｐａｔｈｏｌ，２０００，５３（１２）：８９０—８９２． ［５］Ｖｉｉｇａｎｄ，Ｋ，Ｋ．Ｔａｍｍｕｓ， Ａｌａｍａｅ．Ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ ｏｆＭＡＬ ｇｅｎｅｓｉｎ Ｈａｎｓｅｎｕｌａ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈａ：ｃｌｏｎｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ｍａｌｔｏｓｅ ｐｅｒｍｅａｓｅ ｇｅｎｅ ａｎｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｄｉｖｅｒｇｅｎｔ ｉｎｔｅｒｇｅｎｉｅ ｒｅｇｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｍａｌｔｏｓｅ ｐｅｒｍｅａｓｅ ａｎｄ ｍａｈａｓｅ ｇｅｎｅｓ［Ｊ］．ＦＥＭＳ Ｙｅａｓｔ Ｒｅｓ，２００５，５（１１）： １０１９—１０２８． ［６］ Ｆａｎｇ，Ｊ．Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｉｓｓｕｅ ｆａｃｔｏｒ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｂｙ ａｎｔｉ—ｏｎｃｏｇｅｎｅ ＰＴＥＮ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｎｅｕｒｏｂｌａｓｔｏｍａ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ［Ｊ］．Ｚｈｏｎｇｈｕａ Ｘｕｅ Ｙｅ Ｘｕｅ Ｚａ Ｚｈｉ，２００７，２８（６）：３６３—３６６． ［７］ Ｍｉｍｏｒｉ，ｋ Ｌｏｓｓ ｏｆ ＭＡＬ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｐｒｅｃａｎｃｅｒｏｕｓ ｌｅｓｉｏｎｓ ｏｆ ｔｈｅ ｅｓｏｐｈａｇｕｓ［Ｊ］．Ａｎｎ Ｓｕｒｇ Ｏｎｃｏｌ，２００７，１４（５）：１６７０—１６７７． ［８］ Ｍｉｍｏｒｉ，Ｋ．ＭＡＬ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ ｃａｎｃｅｒ ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ ｍｏｔｉｌｉｔｙ，ｉｎｖａｓｉｏｎ ａｎｄ ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｉｃｉｔｙ ａｎｄ ｅｎｈａｎｃｅｓ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ Ｆａｓ ｐａｔｈｗａｙ［Ｊ］．Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，２００３，２２（２２）：３４６３— ３４７１． ［９］ Ｗａｎｇ，ｚ．Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ ＭＡＬ ｇｅｎｅ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ ｃａｎｃｅｒ ｂｙ ＲＮＡ ｉｎ ｓｉｔｕ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｚｈｏｎｇｈｕａ Ｙｉ Ｘｕｅ Ｙｉ Ｃｈｕａｎ Ｘｕｅ Ｚａ Ｚｈｉ，２０００，１７（５）：３２９—３３１． ［１０］Ｂｕｆｆａｒｔ，Ｔ．Ｅ．Ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒｓ ｉｎ ｙｏｕｎｇ ａｎｄ ｅｌｄｅｒｌｙ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｓｈｏｗ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｇｅｎｏｍｉｃ ｐｒｏｆｉｌｅｓ［Ｊ］．Ｊ Ｐ￣ｈｏｌ，２００７，２１１（１）：４５—５１． ［１ １］Ｈｏｍｅ，Ｈ．Ｎ．Ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＭＡＬ ｇｅｎｅ ｉｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｉｓ ａ ｃｏｍｍｏｎ ｅｖｅｎｔ ｔｈａｔ ｐｒｅｄｉｃｔｓ ｂｅｎｅｆｉｔ ｆｒｏｍ ａｄｊｕｖａｎｔ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ［Ｊ］ ．Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ，２００９，７（２）：１９９—２０９． 【１２］Ｈａｙｅｓ，Ｄ．Ｆ．ＣｉｒｃｕｌａｔｉｎｇＨＥＲ－２／ｅｒｂＢ－２／ｃ—ｎｅｕ（ＨＥＲ一２） ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｄｏｍａｉｎ ａｓ ａ ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ ｆａｃｔｏｒ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｍｅｔａｓｔａｔ— ｉｃ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ：Ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ Ｌｅｕｋｅｍｉａ Ｇｒｏｕｐ Ｂ Ｓｔｕｄｙ ８６６２［Ｊ］． Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ，２００１，７（９）：２７０３—２７１１． （收稿日期２０１５—１—１３）
