江苏农业科学２００９年第１期 维生素Ａ缺乏对大鼠胚胎生长发育的影响 杨玉红 （鹤壁职业技术学院，河南鹤壁４５８０３０） 摘要：将雌鼠随机分为对照组和维生素Ａ缺乏组，通过胎鼠的大体标本和骨骼标本观察维生素Ａ缺乏对大鼠胚胎生长 发育的影响，结果表明，维生素Ａ缺乏导致胎鼠的体重、身长、尾长明显小于对照组，囟门明显大于对照组，第２、５、６胸骨残缺 以及前爪骨化不完全者、脑淤血、脑水肿以及肾盂积水者明显多于对照组。 关键词：维生素Ａ；鼠；胚胎；生长发育 中图分类号：Ｒ３６５．５９１ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２—１３０２（２００９）０１－０２２９—０２ 维生素Ａ在动物生长发育以及在维持机体正常生理功 养，常规适应性饲养１周后，将雌鼠按体重随机分为对照组 能方面都发挥重要作用，特别是与胚胎的形成发育密切相 （Ａ组）和维生素Ａ缺乏组（Ｂ组）。Ｂ组饲料按ＡＯＡＣ配方 关 。它还能抑制恶性肿瘤细胞系的增殖，诱导某些细胞 修改制成（表１），在Ｂ组饲料的基础上Ａ组添加维生素Ａ （如 鼠胚胎瘤细胞、畸胎瘤干细胞及ＨＬ一６０细胞系）的分 ４ ０００ ＩＵ／ｋｇ（１．２ ｍｇ视黄醇）。雄鼠喂以普通饲料。各组自 化 ］。维生素Ａ缺乏可导致暗适应力下降、夜盲症及干眼病 由进食进水，自然光照，湿度５５％，室温２０—２５℃。每周观 等。近些年来研究发现，维生素Ａ缺乏还可引起机体免疫力 察Ｂ组大鼠的一般表现，注意是否有维生素Ａ缺乏症状。在 下降，感染性疾病增加以及造血系统功能障碍等，严重的还导 试验第八周，按雌：雄＝２：１合笼交配。第二天早晨查到阴 致胚胎畸形，主要累及的系统和器官包括眼、泌尿生殖道、膈、 栓或精子者记为怀孕０ ｄ，在怀孕２１ ｄ，将孕鼠断头留取血标 肺、神经系统等 。本试验通过胎鼠的大体标本和骨骼标本 本，立刻剖腹取出胎鼠，计算每只孕鼠的胚胎数、活胎数，观察 观察维生素Ａ缺乏对大鼠胚胎生长发育的影响，同时观察是 有无畸胎；测量每只胎鼠的体重、身长、尾长、胎盘重量，分组 否有畸形出现。 进行统计分析。 １．２胎鼠骨骼、内脏标本的制作检查 ． １材料与方法 将每窝的半数胎鼠去皮、去内脏及颈背部脂肪，放入装有 １．１动物模型及分组 茜素红一Ｓ应用液的透明缸中染色６—４８ ｈ，并轻摇１—２ 清洁级Ｗｉｓｔａｒ雌性大鼠３０只，雄性大鼠ｌ５只，体重５５ 次／ｄ，至头骨染红为宜，再放人透明液Ａ中１～２ ｄ，然后放入 ～６５ ｇ，购自河南省实验动物中心。全部采用不锈钢鼠笼喂 透明液Ｂ中２—３ ｄ，待骨骼染红而软组织基本褪色时，将标 本放入小平皿中，用透射光源在体视显微镜下作整体观察，逐 收稿日期：２００８—０６—１０ 步检查骨骼，包括头骨、囟门大小、胸骨、肋骨、脊椎、四肢骨。 作者简介：杨玉红（１９６６一），女，河南鹤壁人，硕士，副教授，主要从事 另一半胎鼠用Ｂｏｕｉｎｓ溶液浸泡２—４周后，作内脏检验。 生物化学研究。Ｔｅｌ：（０３９２）３９１２９８６；Ｅ—ｍａｉｌ：ｓｈｅｍｉａｏ６７８９＠ｓｉｎａ． （上接第２２８页） 现代医学应用较为广泛，用斑蝥素治疗人的原发性肝癌、病毒 性肝炎、风湿痹痛、过敏性鼻炎、甲沟炎、神经性皮炎等疾 表２ 中药斑蝥注射液对鸡新疫病毒增殖的抑制作用测定结果 病吲，而动物医学对斑蝥的作用研究较少。本试验应用斑蝥 注射液，对人工接种新城疫病毒的鸡胚进行体外抑制试验，并 取得了很好的效果，为以后临床应用探索理论依据。 参考文献： 注：同列数字后标 表示与试验Ⅲ组差异极显著（Ｐ＜０．Ｏ１）。 ［１］尹秀玲，牛发良，白迎春，等．中药“病毒克”颗粒剂对人工感染新 城疫鸡肝功能指标的影响［Ｊ］．中国家禽，２００６，２８（３）：ｌ５—１７． 的广泛应用，使该病多以慢性或散发为特点 。鸡新城疫发 ［２］姜宗敏，张秀英，任艳红．６种中药在鸡胚中对新城疫病毒活性 病后，目前还无有效疗法。用中药治疗畜禽病毒性传染病，已 的影响［Ｊ］．动物医学进展，２００５，２６（２）：９８—１００． 有很多成功经验，但用斑蝥治疗鸡新城疫未见报道。本试验 ［３］程太平，师丽敏，姬茜茜．３种血清学试验检测鸡血清中鸡新城 为临床治疗鸡新城疫提供了理论依据。 疫抗体的比较研究［Ｊ］．江苏农业科学，２００７（２）：１２８—１３０． 本试验用的斑蝥为芫菁科昆虫南方大斑蝥的干燥全虫。 ［４］梁宏志．黑龙江省鸡新城疫的流行现状及防制［Ｊ］．黑龙江畜牧 现代药学研究表明主要成分是斑蝥素。斑蝥素具有抗肿瘤、 兽医，２ｏｏ５（７）：８５—８６． ［５］宋立人．中华本草［Ｍ］．上海：上海科学技术出版社，１９９９：１９９— 增加白细胞、提高免疫功能 ，抗炎、抗菌、抗病毒等作用。 ２０３． 江苏农业科学２００９年第１期 １．３母鼠血清维生素Ａ水平的测定 表１ Ｂ组饲料配方 组分 酪蛋白‘ 玉米淀粉 玉米油 纤维素 含量（％） ２０ 采用荧光法（日立公司Ｆ一３０００型荧光分光光度计）测 定孕鼠血清维生素Ａ，维生素Ａ标准购自Ｓｉｇｍａ公司。 １．４统计处理 ６５ ８ ｌ １ 各组数据用平均数±标准差（ ±ｓ）表示，用ｔ检验分析， 对齐性检验不齐的资料进行ｔ检验，显著水平ｏＬ＝０．０５。 ２试验结果 维生素混合盐‘ ’ 无机盐混合盐（ ’ ５ 注：（１）无维生索Ａ。（２）ａ：混合维生素配方（１ ｋ穷饲料含）：维 生素Ｄ３ １×１０ ＩＵ、维生素Ｅ ５×１０ ＩＵ、维生素Ｂ】６００ ｍｇ、维生素 ７００ ｍｇ、维生素Ｂ２ ６００ ｎａｇ、叶酸２００ ｍｇ、Ｄ一生物素２Ｏ ｍｇ、维生素Ｋ ５ｍｇ、维生素Ｂ１２ １ ｍｇ、尼克酸３ ｇ、Ｄ一泛酸钙１．６ ｇ；ｂ：对照组饲料配 方：除了ａ项内所有维生素外，包含维生素Ａ ４ ０００ ＩＵ／ｋｇ。（３）混合 无机盐配方（１ ｋｇ饲料含）：ＣａＨＰＯ４ ５００ ｇ、ＮａＣ１ ７４ ｇ、Ｋ３Ｃ６Ｈ５Ｏ７・ Ｈ２Ｏ ２２０ ｇ、Ｋ２ＳＯ４ ５２ ｇ、ＭｎＣＯ３（４３％～４８％）３．５ ｇ、枸橼酸铁１５ ｇ、 ＺｎＣＯ３（７０％）１．６ ｇ、ＫＩＯ３ ０．０ｌ ｇ、ＣｕＣＯ３（５３％～５５％）０．３ ｇ、 Ｎａ２ＳｅＯ３ ５Ｈ２Ｏ ０．０１ ｇ、Ｈ２Ｏ２ ２０ ｇ，ＣｒＫ（ＳＯ４）２・１２Ｈ２Ｏ ０．５５ ｇ。 试验末期Ｂ组大鼠出现皮毛干枯、反应淡漠、少食少动、 胡须脱落等维生素Ａ缺乏症状。从表２可见，Ｂ组孕鼠血清维 生素Ａ水平明显低于对照组（Ｐ＜０．０１）。其胎儿体重、身长、 尾长均明显小于对照组（Ｐ＜０．０５）；胎盘重量无显著性差异。 从表３可见，Ｂ组胎鼠的骨骼发育明显滞后于对照组，骨 骼发育不良胎鼠数明显多于对照组。 从表４可见，Ｂ组胎鼠脑积水、脑淤血、肾孟积水数明显 多于对照组，可以推测出，维生素Ａ缺乏可能对大鼠脑、肾组 织有影响。肉眼未检查出腭、舌、唇、眼、脊髓、心、肺、肝、生殖 器官、膀胱有明显异常。 表２维生素Ａ缺乏对孕鼠血清及胎鼠体重、身长、尾长的影响 表３ 维生素Ａ缺乏对胎鼠骨骼发育的影响 表４维生素Ａ缺乏对胎鼠脑肾的影响 会降到一个非常低的水平直至耗竭自身来满足胎儿。本试验 结果表明：长期缺乏维生素Ａ，可致大鼠胚胎生长发育不良， 骨骼发育不全甚至影响内脏发育，因此孕妇应该适量补充维 生素Ａ。 参考文献： ［１］吐尔逊江－买买提明，王晓军，孙娟娟，等．维生素Ａ缺乏对胎儿 及儿童的影响［Ｊ］．中国临床康复，２００４，８（２７）：５９４４—５９４５． ３讨论 ［２］何生虎，曹晓真，姚占江．动物维生素Ａ缺乏的研究进展［Ｊ］．农 业科学研究，２００５，２６（１）：６３—６６． 维生素Ａ对于维持正常的视觉功能、生长发育、细胞分 化以及生殖及免疫系统的完整性是必不可少的。维生素Ａ ［３］徐宏伟，马爱国．维生素Ａ缺乏对大鼠生精能力及睾丸标志酶活 性的影响［Ｊ］．中国公共卫生，２００２，１８（１１）：１２９８—１２９９． ［４］徐宏伟，刘３０８． 缺乏会导致暗适应力下降、生长迟滞、睾丸和卵巢等器官萎 缩、上皮细胞角化过度等 ’。母体维生素Ａ供应不足时，会 导致胎儿发育不良，严重时可导致胎儿流产或吸收，甚至不 颖，马爱国，等．维生素Ａ缺乏对大鼠体格生长及生 殖器官发育的影响［Ｊ］．青岛大学医学院学报，２００１，３７（４）：３０６ —孕。维生素Ａ严重缺乏会导致一系列畸形：如小眼或无眼、 前肢畸形、裂面上腭发育不全等。这些影响在实验室条件下 很难观察到 。 哺乳动物通过调节母体维生素Ａ水平来避免胎儿维生 素Ａ的缺乏。当维生素Ａ供应不足时，母体储存的维生素Ａ ［５］李京东，肖素荣．浅谈维生素Ａ［Ｊ］．中国食物与营养，２００２（２）： ４７—４９． ［６］邝少松，潘甜美，王刚，等．维生素Ａ与实验动物的营养和健康 ［Ｊ］．实验动物科学，２００４，２４（４）：２４５—２４８．