解放军药学学报２０１０年６月２０日第２６卷第３期Ｐｈａｒｍ Ｊ ＰＬＡ，ＶＯ１．２６，ＮＯ．３，Ｊｕｎ ２０，２０１０ 毛细管气相色谱法测定左羟丙哌嗪中有机溶剂残留量 鲁燕侠，刘祖德，沈［摘丹，吴芳 用Ａｇｉｌｅｎｔ ＩＮＮＯＷＡＸ毛细管气相色 要］ 目的建立毛细管气相色谱法测定左羟丙哌嗪中的溶剂残留量。方法谱柱，ＦＩＤ检测器，以甲醇为内标进行测定。结果正己烷、丙酮、乙醇、吡啶的线性范围分别为０—２３２ ｇ／ｍｌ（ｒ＝０．９９９６）， ０～４００ Ｗｇ／ｒｎ１（ｒ＝０．９９９７），０—４ＯＯ Ｉｘｇ／ｍ｜（ｒ＝０．９９９５），０～ｌ６ ｇ／ｍｌ（ｒ＝０．９９９３）；正己烷、丙酮、乙醇、吡啶的平均回收率 分别为９９．９０％，１００．２％，９９．７０％，９９．３１％；ＲＳＤ分别为１．０６％，１．３９％，１．２８％，１．７３％（ｎ＝９）。结论本方法简单、准确、 灵敏度高、重复性好，适用于左羟丙哌嗪中的有机溶剂残留量的测定。 ［关键词］左羟丙哌嗪；毛细管气相色谱法；有机溶剂残留量 ［中图分类号］ Ｒ９２７．２ ［文献标志码］ Ａ ［文章编号］ １００８－９９２６（２０１０）０３－０２４１－０３ ［ＤＯＩ］ １０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００８－９９２６．２０１０．０３．０１９ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｒｅｓｉｄｕａｌ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｏｌｖｅｎｔｓ ｉｎ ＬｅＶ０ｄｒｏｐｒｏｐｉｚｉｎｅ ｂｙ Ｃａｐｉｌｌａｒｙ Ｇａｓ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ＬＵ Ｙａｎ—ｘｉａ，ＬＩＵ Ｚｕ－ｄｅ ＳＨＥＮ Ｄａｎ，ＷＵ Ｆａｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｅｐａｒｍｅｎｔ，Ｇｅｎｅｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｐｅｏｐｌｅ Ａｒｍｅｄ Ｐｏｌｉｃｅ Ｆｏｒｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００３９，Ｃｈｉｎａ ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｄｅｖｅｌｏｐ ａ ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｓｉｄｕａｌ ｏｒｇａｎｉｃ ｓｏｌｖｅｎｔｓ ｉｎ ｌｅｖｏｄｒｏｐｒｏｐｉｚｉｎｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｉｎｊｅｃｔｅｄ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ＩＮＮＯＷＡＸ ｃａｐｉｌｌａｒｙ ｃｏｌｕｍｎ ａｎｄ ａｎａｌｙｚｅｄ ｗｉｔｈ ａｎ ＦＩＤ ｄｅｔｅｃｔｏｒ ｕｓｉｎｇ ｍｅｔｈａｎｏｌ ａｓ ｔｈｅ ｉｎｔｅｒｎａｌ ｓｔａｎｄａｒｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｒａｎｇｅ ｏｆ ｎ—ｈｅｘａｎｅ，ａｃｅｔｏｎｅ，ｅｔｈａ— ｎｏｌ，ｐｙｒｉｄｉｎｅ ｗａｓ ０－２３２ ｍｌ（ｒ＝０．９９９６），０－４００ ｍｌ（ｒ＝０．９９９７），０－４００ ｇ／ｍｌ（ｒ＝０．９９９５），０—１６ ｇ／ｍｌ（ｒ＝０．９９９３），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗａｓ ９９．９０％，１００．２％，９９．７０％ａｎｄ ９９．３１％ｗｉｔｈ ＲＳＤ ｂｅｉｎｇ １．０６％，１．３９％，１．２８％ａｎｄ １．７３％（ ＝９），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ，ａｃｃｕｒａｔｅ ａｎｄ ｓｅｎｓｉ— ｔｉｖｅ ｗｉｔｈ ｇｏｏｄ ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ．Ｉｔ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｏｆｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｒｅｓｉｄｕａｌ ｏｒｇａｎｉｃ ｓｏｌｖｅｎｔｓ ｉｎ ｌｅｖｏｄｒｏｐｒｏｐｉｚ— ｉｎｅ． ［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］ｌｅｖｏｄｒｏｐｒｏｐｉｚｉｎｅ；ｃａｐｉｌｌａｒｙ ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ；ｒｅｓｉｄｕａｌ ｏｒｇａｎｉｃ ｓｏｌｖｅｎｔｓ 药物中的残留溶剂是指在原料药、辅料以及制 药典》的要求 ，采用毛细管气相色谱法测定左羟 剂过程中产生，在工艺中难以除尽的有机挥发性化 丙哌嗪原料药中有机溶剂的残留量，方法简便，结果 合物。残留溶剂不但没有疗效，而且具有毒副作用。 准确可靠，对于左羟丙哌嗪原料药及制剂的质量控 药品中残留溶剂的毒性和致癌作用日益引起医药界 制具有参考价值。 的重视。 １仪器与试剂 左羟丙哌嗪（１ｅｖｏｄｒｏｐｒｏｐｉｚｉｎｅ）是由意大利 Ｄｏｍｐｅ Ｆａｒｍ Ｓ．Ｐ．Ａ公司１９８８年开发上市的新型镇 Ａｇｉｌｅｎｔ６８９０增强型气相色谱仪，６８９０工作站 咳药，其效果与外消旋羟丙哌嗪相同，几乎无原羟丙 （Ａｇｉｌｅｎｔ公司）。左羟丙哌嗪原料药（纯度均＞ 哌嗪的中枢镇静作用，对心血管和呼吸系统不产生 ９９％，湖南九典制药有限公司，批号：０８０９０１， 任何明显作用，无药物依赖性，耐受指数高，疗效更 ０８０９０２，０８０９０３），丙酮、正己烷、乙醇、吡啶均为分 持久，具有良好的临床应用前景 ］。该药在国内已 析纯，甲醇（内标物）为色谱纯，二甲基亚砜为光谱 有湖南九典制药有限公司的产品上市。但有关该药 纯。 品中溶剂残留的检测未见报道。本实验依据《中国 ２方法与结果 作者简介：鲁燕侠，硕士，副主任药师。研究方向：药物分析。Ｔｅｌ： ２．１色谱条件色谱柱：Ａｇｉｌｅｎｔ ＨＰ．ＩＮＮＯＷＡＸ固 １３６１ １ １４３３５８ 定液为键合聚乙二醇，３０ ｍ×０．５３ ｍｍ，ｄｆ＝１．０ 作者单位：１０００３９北京，武警总医院药剂科 Ｉｘｍ，毛细管柱；气化室温度：２０００（：；程序升温：起 解放军药学学报２０１０年６月２０目睇２６卷第３期Ｐｈａｒｍ ＪＣｈｉｎＰＬＡ，ＶＯＩ．２６，ＮＯ．３，Ｊｕｎ ２０，２０１０ 始温度为４０℃，保持５ ｍｉｎ，然后以１０ｏＣ／ｍｉｎ升温 至１００℃，保持２ ｍｉｎ，然后以４０ｏＣ／ｍｉｎ升温至 ２２０℃，保持５ ｍｉｎ；载气为氦气；分流比：１０：１；进 色谱仪，记录峰面积，根据峰面积计算样品溶液中各 溶剂的浓度，再与加入值进行比较，计算回收率。结 果见表２。 样量：１ ｌ；检ｉ见０器温度：氢焰离子化检测器 （ＦＩＤ），２２０￣Ｃ。 ２．２溶液的制备（１）内标溶液精密量取甲醇 １８９．９ （约相当于１５０ ｍｇ），置１００ ｍｌ量瓶中，用 二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为内标溶液。 （２）对照品溶液精密量取丙酮３１６．２ ｌ（约相当 于２５０ ｍｇ），乙醇３１６．５ ｌ（约相当于２５０ ｍｇ），正 己烷２２０．０ ＩＸｌ（约相当于１４５ ｍｇ），置５０ ｍｌ量瓶 中，用二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为对照品 贮备液Ａ；精密量取吡啶４０．７ ｌ（约相当于４Ｏ ｍｇ），置１００ ｍｌ量瓶中，用二甲基亚砜稀释至刻 度，摇匀，作为对照品贮备液Ｂ。精密量取对照品 贮备液Ａ １０ ｍｌ与对照品贮备液Ｂ ５ ｍｌ置同一 １００ ｍｌ量瓶中，用二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀， 作为对照品贮备液。精密量取对照品贮备液５ ｍｌ，置１０ ｍｌ量瓶中，精密加入内标溶液１ ｍｌ，加二 甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。 （３）供试品溶液取本品约０．５ ｇ，精密称定，置１０ ｍｌ量瓶中，精密加入内标溶液１ ｍｌ，加二甲基亚砜 适量，振摇使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试 品溶液。 ２．３系统适用性试验精密吸取对照品溶液、内 标溶液、供试品溶液各１ ＩＸｌ，注人气相色谱仪，记 录色谱图，测定各有机溶剂的分离度及柱效。结 果表明，以上各有机溶剂计算的理论塔板数均达 到５０００以上，相邻溶剂峰的分离度均＞１．５。色 谱图见图１。 ２．４线性关系精密量取对照贮备液０．５、１．０、 ２．０、４．０、５．０、６．０、８．０ ｍ１分别置１０ ｒＩｌｌ量瓶中，各 精密加入内标溶液１ ｍｌ，加二甲基亚砜稀释至刻度， 摇匀。分别精密量取上述各浓度溶液１ ＩＸｌ，注入气 相色谱仪，测定。分别以丙酮、乙醇、正己烷、吡啶对 照品溶液的峰面积与甲醇（内标）峰面积的比值为 纵坐标（Ｙ），以丙酮、乙醇、正已烷、吡啶的浓度为横 坐标（Ｘ），进行线性回归。结果见表１。由表１可 知，正己烷、丙酮、乙醇、吡啶在相应的浓度范围内呈 良好的线性关系。 ２．５ 回收率试验分别取本品（批号：０８０９０１）约 ０．５ ｇ，精密称定，置１０ ｍｌ量瓶中（共９份），精密加 入对照品贮备液４ ｍｌ（３份）、５ ｍｌ（３份）、６ ｍｌ（３ 份），分别精密量取上述各浓度溶液１ ｌ，注入气相 Ｂ ＼ ｔ￣ｕａ） Ａ：对照品；Ｂ：供试品；Ｃ：内标溶液； １：正己烷；２：丙酮；３：甲醇；４：乙醇；５：吡啶 图１各溶剂的毛细管气相色谱图 表１线性范围及回归方程（ｎ＝７） ２．６精密度试验精密量取对照品溶液１ ｉｘｌ，按上 述测定法操作，重复进样６次，记录峰面积，计算。 结果表明正己烷、丙酮、乙醇、吡啶峰面积的ＲＳＤ分 别为１．８６％、０．４０％、０．３５％、０．６８％，方法精密度 符合要求。 ２．７最低检出限的测定取对照品溶液逐步稀释 进样１ ＩＸｌ，测得正己烷、丙酮、乙醇、吡啶的最低检出 限分别为０．１８、０．３１、０．３１、０．５ ｇ／ｍｌ。 ２．８样品测定按２．２项下制备供试品溶液，对照 品溶液，分别测定，记录色谱图，按内标法以峰面积 计算各溶剂含量，结果见表３。 解放军药学学报２０１０年６月２０日第２６卷第３期Ｐｈａｒｍ Ｊ Ｃｈｉｎ ＰＬＡ，ＶＯ１．２６，ＮＯ．３，Ｊｕｎ ２０，２０１０ 表２回收率试验结果（ ＝９） 表３左羟丙哌嗪中有机溶剂残留量测定结果（ｎ＝６） ３讨论 药物生产过程中残存的有机溶剂不仅对人体有 害，而且与药物的治疗作用无关，原则上应愈少愈 好 』。该药物在合成过程中采用了丙酮、正己烷、 乙醇、吡啶等有机溶剂，均属药典第二、三类限制使 用的残留溶剂品种。故对此４种有机溶剂加以检 测，有利于药物的质量控制。 采用内标法测定有机溶剂的含量，可以减少仪 器误差及实验者的操作误差。理想的内标物的选择 应在分析的样品中部出峰，且与有机溶剂残留的对 照品无干扰。经对多种有机溶剂的筛选，选择甲醇 为内标可以和这４种有机溶剂达到有效分离，无干 扰，方法学验证得到满意结果，精密度符合文献［２］ 要求（ＲＳＤ＜５％），因此该方法应用于有机溶剂的含 量测定准确、可信。 采用本方法整个分析过程在２１ ｍｉｎ内完成，快 速简便，能够有效监测药品的质量，可以为生产工艺 的改进提供良好的检验手段，保障用药安全。 根据《中国药典》２００５年版附录ＶＥ中残留溶 剂检测法的有关规定进行检测，结果左羟丙哌嗪原 料药中４种可能的残留溶剂只检出２种：正己烷和 乙醇，均未超标；另外２种丙酮和吡啶均未检出。 ［参考文献］ ［１］ Ｍａｌａｎｄｒｉｎ ＯＳ，Ｍｅｌｉｌｌ ＯＧ，Ｂｅｓｔｅｔｔｉ Ａ，ｅｔ ａ１．Ａｎｔｉｔｕｓｓｉｖｅ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ Ｌｅｖｏｄｒｏｐｒｏｐｉｚｉｎｅ［Ｊ］．ＤｒｕｇＲｅｓ，１９８８，３８（８）：１１４１－１１４３ ［２］ 国家药典委员会．中华人民共和国药典（二部）［Ｓ］．北京：化 学工业出版社，２００５．附录５４－５７ ［３］ ＩＣＨ指导委员会．药品注册的国际技术要求（质量部分）［Ｍ］． 周海钧主译．北京：人民卫生出版社，２００７．８２－８６ 、 （收稿日期：２０１０－０３－２２；修回日期：２０１０－０５－０８） （本文编辑梁爱君）