实验动物使用计划(Animal Using Protocol, AUP)
(201710版)
此栏信息由IACUC办公室填写,申请者请勿填写 IACUC批准编号: 修订号: 收件日期: 批准日期: 失效日期:
申请者须知 1. 为了节省纸张和时间,请申请者先提交电子版AUP至武汉大学实验动物管理与使用委员会(IACUC)的邮箱(lac@whu.edu.cn); 2. IACUC秘书首先对收到的AUP进行形式审查,符合要求的将提交给IACUC审查,审核时间需要2周,之后会及时向申请者反馈结果; 3. 申请者根据审查反馈情况修改完善AUP,在IACUC确认后打印一式两份,项目负责人在AUP上签字,送至中心行政楼301室; 4. 本AUP表审核通过后,方可订购实验动物 ! ! !
一、项目信息(在合适的选择项前打“”)
□初次申请 □ 年度复审,原AUP号是:( ) 项目名称(中文): 项目名称(English): 项目类型:□科学研究 □教学训练 □其它:( ) 单位(院系): 项目负责人 中文: (PI) 拼音/英文: Email: 实验室地址: 动物项目负责人: Email: 联系人: Email:
二、项目来源: 项目类型 职称/职务: 办公(实验室)电话: 职称/职务: 手机: 职称/职务: 手机: 课题编号 课题名称 第 1 页 共 11 页
课题负责人 项目类型请填写:国家重大专项、973计划、863计划、国家/省/市/校级自然科学基金或其它类型基金
三、动物实验操作人员经历和培训:
1. 所列人员必须经过培训或在经培训的工作人员陪同下开展工作。 姓名 专业 实验动物 从业人员 上岗证编号 手机 Email 在本项目中的职责(实验设计、实验管理、主操作、操作助手、手术者、麻醉师、动物管理等) 2. 列出每个人在各自职责领域的实验经历和资质,外科手术人员请重点描述 姓名
实验经历和资质 四、使用动物的目的和意义:
以一般非生物医学背景人员为对象,用通俗的语言描述研究目的,对人类、动物的健康
或科学的贡献。(,避免使用简写和缩写) 研究背景: 用动物做什么: 解决什么问题: 必要性和重要性:
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五、危险性物质的使用(在合适的选择项前打“”)
1.根据本计划中的危险物质的使用情况填写 □ 不使用 □ 使用 本计划中的有害物质属于: □ 放射性同位素 □ 致癌物/致突变物 □ 化学有害物 □ 感染性物质 □ 重组DNA □ 病理组织 □ 肿瘤细胞 □ 其他有害物质( ) 2.详细描述有害物质的名称、剂量、给药途径、频率 名称 来源 剂量 给药途径 频率 3.详细描述对人、动物、环境的危害性,以及采取的个人防护措施和废弃物处理方法 危害性: 个人防护措施: 废弃物处理方式: 4.项目负责人承诺 承诺:本项目组及其成员已了解国家对危险品管理的法规以及武汉大学和中心的相关管理规定,不违规使用危险物质,如需使用,一定按正规程序申报,并严格按照正确的个人防护和处置方式开展实验。若因违法违规使用危险性物质而产生严重后果,本人愿承担所有责任。 项目负责人(签字): 日期: 年 月 日
六、非药品级物质在动物体内的使用(在合适的选择项前打“”表示)
1. 使用情况(非药品级物质,指除未获得国家食药监局或兽药批文的药品或保健品或医疗器械)
□ 不使用 □ 使用 本计划中的非药品级物质属于: □ 化学物质 □ 生物制品 □ 其它( ) 2.描述物质的相关信息 名称 厂家/来源 批号 剂量 给药途径 频率 质量凭证、除菌措施、保存条件
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七、实验动物信息 (在所有适合的项目前打 )
针对使用的每一种动物的品系填写每一栏。如果使用了3种以上或3个品系以上的动物,可在后面增加列。 内容 品种 品系 基因型 (野生型可不填) 性别 年龄范围 体重范围 饲养环境(普通、屏障/IVC和隔离) 是否要求繁殖 .动物数量 动物来源 拟申请笼位数 预计饲养时间 特殊要求
A B C □ 中心统一采购:维通利华、华阜康、斯莱克 □ 国内其它繁育机构,机构名称:( ) □ 国外引进,机构名称:( ) 开始时间:( 年 月 日) 结束时间:( 年 月 日) 八、动物使用的理由和替代方法的检索(在所有适合的项目前打 )
1. 通过何种方法得出实验所需的动物数量。
□ 统计分析显示,实验计划的(动物)数量是最少的,符合统计学上对实验假设进行有效检验的要求。
□ 实验将进行多个独立因素结果的对比,因此要求多组。
□ 结果的检测或者被检测的现象是可变的,大样本量对于统计上有效的取样是必需的。 □ 来自于对照组的差异预计是很小的。对于可靠地区分组间差异,大样本量是必需的。 □ 实验具有技术上的困难,需要多次尝试以便从每一次实验中获得令人满意的数据。 □ 其他(请解释): 2. 在本实验中使用活体动物的理由是什么?
□ 本研究要求对活体动物进行行为测量。
□ 本研究要求对活体动物进行生物学检测或活体动物的组织样本取材。 □ 在本实验中,计算机或者其他模型不能代替动物。 □ 本研究不能做离体实验。
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□ 其他(请解释):
3. 解释为什么你的研究中将要使用的动物种类是合理的。
□ 本实验是以前使用该品种动物实验工作的直接延续。
□ 本研究致力于扩展以前的从其它品种到这个品种的实验结果。 □ 对于该品种动物很重要的生理/行为学现象,现在缺乏了解。
□ 对于这个品种动物很重要的生理/行为学现象的相关内容比其他品种了解得更多。 □ 这个品种的选择体现出了在能够使用的最低级的生物体和与人类的生理/行为最相近的模型系统中间最好的折衷方案。
□ 对于计划开展的研究这个品种是最经济的。 □其他(请解释): 4. 在实验设计开始前寻找活体动物使用的替代方法。 至少选择2种查阅的数据库: □ PubMed □ Web of Scienc □ 知网 □ 万方 □ 维普 □ 其它数据库:( ) 检索日期: ( ) 年( )月( )日 检索涵盖的年份: ( ) 年 至( )年 检索关键词(如:高血压动物模型,非动物模型,疼痛,紧张,在体外,培养): 1.( ); 2.( ); 3.( ); 4.( ); 5.( ); 6.( ) 是否有活体动物实验的替代方法: □ 没有 □ 有
九、本实验可能造成的紧张和疼痛的处理(在合适的选择项前打“”)
1.请描述本实验可能对动物造成哪些不良后果和护理措施 不良 后果 选择项 □呼吸困难 □进食困难 □体重快速下降 □神经紊乱 □行动困难 □严重感染 □肿瘤 □剧烈疼痛 □严重腹泻 □大量失血 □体温失调 □营养不良/脱水 □其它( ) 护理 措施 □每天观察至少2次 □每周称重至少2次 □麻醉镇痛(详见麻醉镇痛部分) □治疗措施( ) 2.参考美国农业部USDA分类标准,请选择疼痛级别: □ C类:最小的,短暂的,一过性的或无疼痛或紧张
□ D类:有疼痛和紧张,通过麻醉、镇痛、镇静等适当的方式缓解疼痛和紧张 □ E类:有疼痛和紧张,但没有采取缓解的疼痛和紧张的措施 3.描述麻醉剂的使用方法 麻醉剂名称 浓度 剂量 给药途径 给药频率 来源
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推荐麻醉剂列表 种属 异氟烷 三溴乙醇 小鼠 吸入 1-4% 大鼠 吸入 1-4% 猕猴 吸入1.28% 戊巴比妥钠 *氯胺酮+赛拉嗪 80-100mg/kg+10mg/kg, IP, 20-30min 40-75mg/kg+5-10mg/kg, IP, 20-40min 7-10mg/kg+0.6-2mg/kg, IM, 20-30min *替来他明 不适用 240mg/kg 30-50mg/kg, IP, 15-45min IP, 20-40min 不适用 不适用 40-60mg/kg, IP, 20-60min 20-30mg/kg, IV, 20-40min 不适用 4-6mg/kg, IM, 30min *表示属于管制类药品
注: 本中心不推荐使用的麻醉剂:水合氯醛。 2.描述镇痛剂的使用方法,术中和术后必须使用镇痛剂 镇痛剂名称 浓度 剂量 推荐镇痛剂列表 镇痛剂 对乙酰氨基酚 卡洛芬 酮咯酸 美洛昔康 丁丙诺啡 (管制类) 品种 小鼠 大鼠 猴 所有动物 小鼠 大鼠 猴 剂量 200mg/kg 5mg/kg 5-10mg/kg 0.2-2mg/kg 0.05-0.1mg/kg 0.01-0.05mg/kg 0.015mg/kg 途径 PO SC IM PO SC IM, SC IM, SC IM, SC 给药途径 给药频率 来源 3.描述对动物造成疼痛,但没有使用麻醉剂和镇痛剂的科学理由 科学理由: 参考文献:
十、需要说明的特殊情况 (在合适的选择项前打“”)
1. 是否在本中心外的设施中开展部分动物实验
□ 是 □ 否, 如果是,请在下面描述实验内容、地点、环境标准、时间 2. 是否存在单笼饲养
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□ 是 □ 否, 如果是,请在下面描述科学理由和如何增加环境丰富度的措施 3.是否存在禁食禁水(手术前除外)
□ 是 □ 否, 如果是,请在下面描述禁食禁水的科学理由、时间和如何保证动物不
会出现危险状况
4. 自带饲料或使用特殊饲料
□ 是 □ 否,如果是,请在下面描述饲料的厂家或来源、灭菌方法、是否可以提供灭
菌凭证 5.是否自带仪器设备进入动物房
□ 是 □ 否,如果是,请在下面描述设备的名称、体积、电源要求、使用时间、消毒措
施 6.是否存在长时间保定
□ 是 □ 否,如果是,请在下面描述长时间保定的科学理由、方法、保定时间,如何保
证动物的正常生理
十一、实验设计和动物实验操作 (在合适的选择项前打“”)
根据实验内容填写以下实验信息: 1. 是否需要繁殖动物:
□ 是 □ 否, 如果是,请描述繁殖动物的目的、数量和方法 2.动物分组和动物数量(如列数不够可自行增加) 组号 组名 动物数/组 动物总数 1组 2组 3组 4组 5组 6组 第 7 页 共 11 页
3. 实验主要流程和步骤(下表为范例,请在下表中根据实验计划修改后填写) 时间 实验前3-7天 适应期 0天 7天 14天 21天 实验开始:注射肿瘤细胞建立动物模型 采血1 采血2 处死动物采集样本 内容 中心饲养间 中心操作室 中心操作室 中心操作室 中心解剖间 地点 4. 动物标记方法 (禁止使用苦味酸!!!)
□ 耳孔/耳标 □ 剪脚趾(10天内的鼠适用) □ 按笼盒区分 □ 动物专用标记笔 □ 项圈(大动物,非铁丝) □ 纹身(大动物) 5. 是否对动物给药和接种
□ 是 □ 否, 如果是,请描述下表中的信息 物质名称 浓度 剂量 体积ml/kg 部位/途径 针头大小 时间点 推荐最大给药体积(ml)和针头规格 小鼠 大鼠 猕猴 皮内(ID) 皮下(SC) 0.05, ≤4.5# 0.1, ≤4.5# 0.1, ≤4.5# 2-3, ≤7# 5-10, ≤7# 10-30, ≤7# 肌肉(IM) 腹腔(IP) 静脉(IV) 0.05, ≤5.5# 0.3, ≤6.5# 1-2, ≤7# 50-100,≤7# 2-3, ≤6.5# 0.2, ≤4.5# ≤5.5# 10-20, ≤7# 灌胃(IG) 1, 9G,12G 1-2, 16G,20G 10-20, 胃管8mm 5-10,≤6.5# 0.5, # 为中国标准,G为国际标准 6. 是否对活体动物采集血液
□ 是 □ 否, 如果是,请描述下表中的信息 采血量ml 部位 频率/时间点 针头大小 方法 安全采血量 品种 小鼠 大鼠 猴 循环血量(CBV) 75ml/kg 65ml/kg 70ml/kg 体重 20g 200g 3000g 1次/周 (7.5%CBV) 0.11ml 0.97ml 15.75 1次/(2-4)周 (10%CBV) 0.15ml 1.3ml 21ml 第 8 页 共 11 页
7. 是否存在对活体动物其它类型样本的采集
□是 □否, 如果是,请在下表描述相关信息 样本名称 采集量 部位 频率或时间点 器械规格 方法 8. 是否存在外科手术
□是 □否, 如果是,请填下面手术属性和详细内容: (1)是否属于恢复性手术(恢复性:术后需要存活的)
□是 □否
(2)是否需要对同一动物进行多次重大重复手术?
□是 □否:
如果是,请说明充分的科学理由:( ) (3)参与手术人员和地点 主手术者 手术助手 麻醉师 记录员 其他辅助人员 术后护理人员 手术地点 (4)描述手术的详细方案和步骤 术前准备: 术中方案: 术后护理: 第 9 页 共 11 页
十、实验过程中动物安乐死标准和结束后动物的处置(在合适的选择项前打“”)
1.请在下表中勾选至少2个可实施动物安乐死的指标 体重 外观 行为 □体重迅速下降超过20% □被毛杂乱、无光泽 □消瘦 □严重腹水 □无法进食和饮水 □昏迷 □瘫痪 □弓背蜷缩 □颤抖 □呼吸困难 症状 肿瘤相关 其它标准 □严重腹泻且治疗无效 □严重脱水 □感染严重且治疗无效 □肿瘤直径超过20mm(小鼠)和40mm(大鼠) □肿瘤破溃和感染 2.请描述实验结束后动物的处死方法或因动物意外必须提前实施安死术的方法 □ CO2 (大小鼠、豚鼠,不适合新生动物) □ 麻醉后脱颈椎(小鼠) □ 过量注射麻醉剂(兔、犬、猪、猴)* □ 麻醉后断头(大小鼠,需断头器)* □ 麻醉后下放血(大小鼠、豚鼠)* □ 麻醉下灌流*(大小鼠) * □ 其它安乐死的方法*** 不推荐直接颈椎脱臼法,推荐CO2或异氟烷等麻醉后颈椎脱臼,如不先麻醉就行颈椎脱臼,请描述详细的科学理由 *描述麻醉剂的用法,过量麻醉推荐使用戊巴比妥钠,100mg/kg,静脉注射 名称
**详细描述其它安死术方法
3.实验结束后非处死动物的处置方式 □ 继续在其它项目中使用 (项目名称: 项目批准AUP号: ) □ 机构代养 (代养机构名称: ) 第 10 页 共 11 页
剂量 给药途径 □ 放生野外 (放生地点: ) □ 其它 (详细说明: )
十五. 项目负责人的承诺:
1. 我保证在此提请的陈述是完整的且准确的,本方案中的动物使用没有单纯重复以前的实
验。 2. 如果方案被批准,我同意以书面形式告知动物管理与使用委员会(IACUC)任何的紧急
情况,且同意在问题解决之前将不会继续实验。 3. 没有提交实验方案的书面修改稿给IACUC,且经IACUC审查、批准之前,我将不会对
涉及动物的程序做出较大的改动。 4. 没有IACUC和武汉大学动物实验中心主任批准之前,我不会带参观者进入动物设施,
不允许他们对动物进行拍照或者摄影。 5. 保证每个从事与动物有关的工作人员接受合适的培训是我的职责。 6. 在收到IACUC的批准通知之前,我不会开始本方案中所描述的实验操作。
7. 我保证此计划中如果使用到管制药品或危险物质,均符合国家的相关法规,以及学校的
相关规定。 8. 我保证此计划中如果使用到生物材料(包括来自于人和动物),均经过检验,不含对人
或动物有害的病原微生物。 9. 我将保留一个本实验方案的副本及随后所有的通信资料。
10. 我将允许IACUC和主治兽医(AV)有权利查看该项目动物实验记录。在需要时,随时
提供实验记录供管理部门审查。
项目负责人(签名):
日 期: 年 月 日
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