1.什么是微生物？包括哪些主要类群？ .微生物（microorganism）：是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。（<0.1mm）
微米级：光学显微镜下可见（细胞）
小（个体微小）
纳米级：电子显微镜下可见（细胞器，病毒）
单细胞 简（构造简单） 简单多细胞
微生物 非细胞（即“分子生物”）
原核类：细菌（真细菌，古生菌），放线菌，蓝细菌，原
体，立克次氏体，衣原体等
低（进化地位低） 真核类：真菌（酵母菌，霉菌，蕈菌），原生动物，显微
藻类
非细胞类：病毒，亚病毒（类病毒，拟病毒，朊病毒）
2.微生物有哪五大特性？
体积小，面积大；吸收多，转化快；生长旺，繁殖快；适应强，易变异；分布广，种类多。 3.微生物的发展经历了几个阶段？各阶段的代表人物为谁？
史前期：各国劳动人民，未见微生物，先利用，如酿酒，发面，沤肥 初创期：列文虎克，自制显微镜，观察到细菌等微生物个体
奠基期：巴斯德，用实践——理论——实践的方法开展研究，建立微生物学及许多分支学科 发展期：e.buchner，发现微生物的代谢统一性，进入寻找人类动物病原菌的黄金时期 成熟期：j.watson和 f.crick揭示微生物的活动规律，微生物基因组的一眼就促进了生物信息时代的到来。
4.研究微生物学的基本方法有哪些？
答：显微镜技术，无菌技术，纯种分离纯化技术，纯种培养技术，微生物保藏技术
5.什么是无菌操作技术？ 答：
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在微生物转接过程中，一般在火焰旁进行，并用火焰直接灼烧接种环，以达到灭菌的目的，但一定要保证其冷却后方可进行转接，以免烫伤微生物。如果是转接液体培养物，则用预先已灭菌的玻璃吸管或吸嘴
6.细菌的基本形状有几种？细菌大小测量的方法及单位是什么？
3种 单位：µm
7.细菌细胞结构中一般结构和特殊结构分别包括哪些？
一般结构：细胞壁、细胞膜、细胞质和核区特殊结构：鞭毛、菌毛、
8.革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁的主要成份分别是什么？肽聚糖单体是由哪三部分组成的？青霉素的作用位点是哪个部位？
G+细菌的细胞壁：肽聚糖、磷壁酸 G-细菌的细胞壁：外膜
3部分：双糖单位 四肽尾 肽桥 青霉素的作用位点是PBP2
9.何为原生质体、球状体、L-型细菌？
生质体—指在人为条件下，用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制新生细胞壁合成后，所得到的仅有一层细胞膜包裹的圆球状渗透敏感细胞，它们只能用等渗或高渗培养液保存或维持生
长。
球状体—又称原生质球，指还残留了部分细胞壁（尤其是革兰氏阴性菌外层膜）的圆球形原生质体。
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L型细菌—指稳定的L型即那些实验室或宿主体内通过自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺损菌株。
10.何为糖被、芽孢、伴孢晶体？菌毛、性菌毛及鞭毛的功能分别是什么？
糖被—包被与某些细胞壁外的一层厚度不定的透明胶状物质。
芽孢—某些细菌在生长发育后期，在细胞内形成的一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量低、抗逆性强的休眠构造，称为芽孢。
伴孢晶体—少数芽孢杆菌产生的糖蛋白昆虫毒素。
功能：菌毛多存在于革兰氏阴性致病菌中。它们借助菌毛可使自己牢固的黏附在宿主的呼吸道、消化道、或泌尿生殖道等粘膜上。性菌毛一般见于革兰氏阴性菌供体菌中，具有向受体菌传递遗传物质的作用。有的还是RNA噬菌体的特异性吸附受体。鞭毛具有运动功能。
11.细菌主要通过何种方式繁殖后代？什么是菌落？细菌菌落有何特点？
答：细菌的主要繁殖方式为裂殖。菌落—将单个细菌（或其他微生物）细胞或一小堆同种细胞接种到固体培养基表面（有时为内层），当他占有一定的发展空间并处于适宜的培养条件下，该细胞就会迅速生长繁殖并形成细胞堆，此即菌
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落。菌落的特点：湿润、较光滑、较透明、较黏稠、易挑取、质地均匀以及菌落各部分颜色一致。
12.放线菌的菌丝按功能和形态可分为几类型？通常通过什么方式繁殖后代？
答：答：四类——基内菌丝会断裂成大量杆状菌状体的放线
菌、菌丝顶端形成少量孢子的放线菌、具有孢囊并产孢囊孢子的放线菌、具有孢囊并产游动孢子的放线菌。通常借形成各种孢子进行繁殖的。
13.放线菌最主要的特性是什么？菌落有何特点？
放线菌是一类呈菌丝状生长和以孢子繁殖的陆生性较强的原核生物，大部分放线菌都呈革兰氏阳性。
菌落特点:小型、干燥、不透明、表面呈致密的丝绒状，上有一薄层彩色的“干粉”；菌落和培养基连接紧密，难以挑取；菌落的正反面颜色常不一致，以及在菌落边缘的琼脂平面有变形现象。
14.多数蓝细菌具有哪两种重要的功能？完成这两种功能的场所分别在哪个部位？
大多数蓝细菌具有固氮和光合作用的功能。固氮作用主要发生在异形胞内，光合作用主要在类囊体的叶绿素a中进行。
14.酿酒酵母通过何种方式进行有性繁殖和无性繁殖？菌落有何特征？ 通过牙殖的方式进行无性繁殖，通过产子囊孢子的方式进行有性繁殖。
菌落特征：较湿润，较透明，表面较光滑，容易挑起，菌落质地均匀，正面与反面以及边缘与中央部位颜色较一致。
15.霉菌繁殖方式可分为哪两种类型？分别可产生哪些孢子？
霉菌的繁殖方式多种多样，通常可分为有性繁殖和无性繁殖。无性孢子有：孢囊孢子、分生孢子、节孢子、厚垣孢子。有性孢子有：卵孢子、接合孢子、子囊孢子、担孢子。
16.霉菌的菌落特征是什么？
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霉菌的菌落特征：形态较大，质地疏松，外观干燥，不透明，呈现或松或紧的蛛网状、绒毛状、棉絮状或毡状；菌落与培养基的连接紧密，不易挑取，菌落正面与反面的颜色、构造，以及边缘与中心的颜色、构造通常不一致。
17.霉菌的菌丝体可分为哪几种类型？它们分别可分化出哪些特化构造？
答：霉菌的菌丝体可分为两类：密布在固体营养基内部，主要执行吸收营养物质的营养菌丝体；伸展到空间的气生菌丝体。营养菌丝体的特化构造：假根，匍匐菌丝，吸器，附着胞，附着枝，菌核，菌索，菌环和菌网；气生菌丝体的特化构造：结构简单的子实体，结构复杂的子实体，子囊果
18.什么是病毒？有何特点？
答：病毒是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的超显微非细胞生物，其本质是一类含DNA或RNA的特殊遗传因子。特点：1形体及其微小，一般都能通过细菌滤器，2没有细胞构造，其主要成分仅为核酸和蛋白质两种，3每一种病毒只含一种核酸，4既无产能酶系，也无蛋白质和核酸合成酶系，5以核酸和蛋白质等元件的装配实现其大量繁殖，6在离体条件下，能以无生命的生物大分子存在，并可长期保持其侵染活力。7 对一般抗生素不敏感，但对干扰素敏感。8 有些病毒的核酸还能整合到宿主的基因组中，并诱发潜伏性感染。
19.病毒大小测量单位？其化学组成如何？
答：单位：nm。病毒粒的基本成分是核酸和蛋白质。核酸位于它的中心，称核心，蛋白质包围在核心周围，形成了衣壳。
20.什么是烈性噬菌体？其增殖过程分哪几步？
答：凡在短时间内能连续完成吸附，侵入，增殖，成熟，裂解这五个阶段而实现其繁殖的噬菌体，称为烈性噬菌体。 吸附，侵入，增殖，成熟，裂解。
21.什么是一步生长曲线？可分为几个时期？ 答：定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线。 分为：潜伏期，裂解期，平稳期。
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22.什么是溶源菌、温和噬菌体？
答：凡能引起溶源性的噬菌体即称温和噬菌体，而其宿主就称溶源菌。
23.类病毒、拟病毒、朊病毒化学组成如何？
答：类病毒：一类只含RNA一种成分，专性寄生在活细胞内的分子病原体。 拟病毒：一类包裹在真病毒粒中的有缺陷的类病毒。 朊病毒：一类不含核酸的传染性蛋白质分子。
24.微生物营养物质六要素包括哪些？ 答：碳源，氮源，能源，生长因子，无机盐。
25.根据碳源、能源及电子供体的不同可将微生物划分为几种类型？举例说明。
答：光能无机自养型 光能有机异养型 化能无机自养型 化能有机自养
型
26.营养物质进入细胞的方式有几种？各有何特点？
答：1．自由扩散 特点：①物质在扩散过程中没有发生任何反应； ②
不消耗能量；不能逆浓度运输； ③运输速率与膜内外物质的浓度差成正比
2．协助扩散 特点：①不消耗能量 ②参与运输的物质本身的分子结构不发生变化 ③不能进行逆浓度运输 ④运输速率与膜内外物质的浓度差成正比 ⑤需要载体参与
3．主动运输 特点：物质运输过程中需要消耗能量和载体，而且可以进行逆浓度运输。
4．基团移位 特点：基团移位是另一种类型的主动运输，它与主动运输方式的不同之处在于它有一个复 杂的运输系统来完成物质的运输，而物质在运输过程中发生化学变化
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27.什么是培养基？配制培养基时应遵循什么原则？
答：培养基是人工配制的，适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营
养基质。 原则：目的明确 营养协调 理化条件适宜 经济节约
28.培养基按化学成分、物理状态、用途来划分可分为哪几种类型？
答：化学成分：天然培养基、合成培养基、半合成培养基 物理状态：
固体培养基、半固体培养基、液体培养基 用途：基础培养基、加富培养基、选择培养基、鉴别培养基
29.在化能异养微生物的生物氧化中，其基质脱氢和产能途径主要有哪几条？试比较各途径的主要特点。（从产生的还原力、能量来了解） 答：1、EMP
途径 特点：基本代谢途径，产能效率低，提供多种中间
代谢物作为合成代谢原料， 有氧时与 TCA 环连接，无氧时丙酮酸及其进一步代谢产物乙醛被还原成各种发酵产物，与 发酵工业有密切关系。 2、HMP 途径 3、ED 途径 4、TCA 循环 特点：1、为糖、脂、蛋白质三大物质转化中心枢纽。 2、循环中的某些中间产物是一些重要物质生物合成的前体； 3、生物体提供能量的主要形式； 4、为人类利用生物发酵生产所需产品提供主要的代谢途径。如：柠檬 酸发酵；Glu 发酵等。
30.呼吸分为哪几种类型？
答：有氧呼吸 无氧呼吸 发酵
31.什么是紫膜？由何功能？
答：在膜上呈斑片状（直径约 0.5 mm）独立分布，其总面积约占细胞
膜的一半，主要由细菌视 紫红质组成。 功能：能进行独特光合作用
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32.何为生物固氮作用？能固氮的微生物有哪几类？
答：微生物将氮还原为氨的过程称为生物固氮 自生固氮菌 共生固氮
菌 联合固氮菌
33.固氮过程需要满足哪些条件？
答：（1）ATP的供应，（2）还原力【H】及其传递载体，(3)固氮酶，（4）还原底物——N2 ，（5）镁离子。
34.什么叫次生代谢和次生代谢物？
答：次生代谢是指生物合成生命非必需物质并储存次生代谢产物的过程。次生代
谢物是指某些微生物生长到稳定期前后，以结构简单、代谢途径明确，产量较大的出生代谢物作前体，通过复杂的次生代谢途径所合成的各种结构复杂的化合物。
35.什么是纯培养？纯培养养的获得方法有哪些？
答：纯培养是指只在单一种类存在的状态下所进行的生物培养。平板分离法（稀释涂布平板法、稀释混合平板法、平板划线法、单细胞挑取法。
36.微生物的生长可通过哪些方法测定？
答：（1）称干重法（2)比浊法（3)测含氮量（4)血球计数板法（5)液体稀释法（6)平板菌落计数法。
37.什么是典型生长曲线？它可分几个时期？各时期有何特点？在生产实践有何指导作用？ 答：.定量描述液体培养基中微生物群体生长规律的实验曲线，称为生长曲线。
分为延滞期，指数期，稳定期，衰亡期四个时期。延滞期特点：生长速率常数为零；细胞形态变大或增长；细胞内的RNA尤其是rRNA含量增高，原声质呈嗜碱性；合成代谢十分活跃；对外界不良条件反应敏感。指数期特点：生长速率常数R最大，因而细胞每分裂一次所需时间———代时或原生质增加一倍所需的倍增时间最短；细胞进行平衡生长，故菌体各部分的成分十分均匀；酶系活跃，代谢旺盛。稳定期特点：生长速率常数R等于零，即处于新繁殖的细胞数与衰亡的细胞数相等。衰亡期特点：微生物的个体死亡速度超过新生速度，整个群体呈现负生长状态（R为负值）。稳定期的生长规律对生产实践有着重要的指导意义，对以生产菌体或与菌体生长相平行的代谢产物为母的的某些发酵生产来说，稳定期是产物的最佳收获期；对维生素，碱基，氨基酸等物质进行生物测定来说，稳定期是最佳测定时期；此外，通过对稳定期到来原因的研究，还促进了连续培养原理的提出和工艺，技术的创建。
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38.什么是连续培养？有何优点？
答：连续培养是指向培养容器中连续流加新鲜培养液，使微生物的液体培养物长
期维持稳定，高速生长状态的一种溢流培养技术，故又称开放培养。优点：高效；自控；产品质量较稳定；节约了大量动力，人力，水和蒸汽，且使水，气，电的负荷均衡合理。
39.试比较恒化器与恒浊器连续培养的不同。
答：恒浊器是一种根据培养器内微生物的生长密度，并借光电控制系统来控制培
养液流速，以获得菌体密度高，生长速度恒定的微生物细胞的连续培养器；与其相反，恒化器是一种设法使培养液流速保持不变，并使微生物始终在低于其最高生长速率的条件下进行生长繁殖额连续培养的装置。
40.根据微生物对温度的要求不同，可将微生物分为哪几类？ 答：宽温微生物，窄温微生物。
41.什么是最适生长温度和最适生长pH？ 答：
42.根据微生物对氧的需求不同可将微生物分为哪几类？了解图示。 43.什么是灭菌、消毒？
44.什么为抗代谢药物？磺胺类药物的作用机制是什么？ 45.遗传变异的物质基础是什么？证明的著名实验有几个？ 46.何谓基因突变？有哪几个共同特点？
答：通过细胞表面受体介导的信号途径有下列四个步骤组成：1，不同形式的胞
外的信号刺激首先被细胞表面特异性受体所识别，2，第一信使通过适当的分子开关机制实现信号的跨膜转导，产生细胞内第二信使，3，信号放大4，细胞启动反馈机制从而终止或降低细胞反应。作用：维持生命活动的有序性。
47.证明基因突变的自发性和不对应性的实验有哪几个？（反过来如何？）
答：NO通过扩散进入临*滑肌细胞，激活具有鸟苷酸环化酶活性的NO受体，
刺激声称第二信使cGMP,而其作用是通过其依赖的蛋白激酶G的活化抑制肌动——肌球蛋白复合物通路，导致血管平滑肌舒张。
48.何谓置换、移码突变？
答：G蛋白是三聚体GTP结合调节蛋白的简称。当配体与受体结合，三聚体G
蛋白解离，并发生GDP与GTP交换，游离的Ga-GTP处于活化的开启态，导致结合并激活效应器蛋白，从而传递信号；当其水解形成Ga-GDP时，则处于失活的关闭态，终止信号传递并导致三聚体G蛋白的重新组装，系统又恢复静息状态。以CAMP为第二信使的信号通路，反映链：激素--------G蛋白O连受体-------G蛋白-------腺苷酸环化酶-----CAMP-------CAMP依赖的蛋白激酶------------基因调控蛋白---------基因转录。2，G蛋白O连受体介导离子通道的调控。
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激素------G蛋白O连受体-----G蛋白-----质膜上的磷脂C的B异构体的活化------PIP2水解成IP3和DAG。
49.何谓光修复？
答：把经UV照射后的微生物立即暴露于可见光下时，就可出现明显降低其死亡率的现象，此即光复活作用。
50.理解诱变的育种的一般原则。 答： 1)选择简便有效的诱变剂
2）挑选优良的出发菌株 3）处理单细胞或单孢子悬液 4）选用最适的诱变剂量
5）充分利用复合处理的协同效应
6）利用和创造形态、生理与产量间的相关指标 7）设计高效筛选方案
8）创造新型、高效筛选方法
51.何谓营养缺陷型？营养缺陷型筛选的主要步骤。
答：野生型菌株经诱变剂处理后，由于发生了丧失某酶合成能力的突变，因而只
能在加有该酶合成产物的培养基中才能生长，这类突变菌株称为营养缺陷型突变株，或简称营养缺陷型。 筛选步骤：1）诱变剂处理 2）淘汰野生型 3）检出缺陷型 4）鉴定缺陷型
52.原核微生物与真核微生物各有哪些基因重组形式？（掌握其概念和了解一般过程。） 答：原核：1）转化（受体菌直接吸收供体菌的DNA片段而获得后者部分遗传性
状 的现象）
2）转导（通过缺陷噬菌体的媒介，把供体细胞中的小片段DNA携带到
受体细胞中，通过交换与整合，使后者获得前者部分遗传性状的现象）
3）接合（供体菌（雄性）通过性菌毛与受体菌（雌性）直接接触，把F
质粒或其携带的不同长度的核基因组片段传递给后者，使后者获得若干新遗传性状的现象）
真核：1）有性杂交（一般指不同遗传型的两性细胞间发生的接合和随之进行的
染色体重组，进而产生新遗传型后代的一种育种技术）
2）准性杂交（一种类似于有性生殖，但比它更为原始的两性生殖方式，
这是一种在同种而不同 菌株的体细胞间发生的融合，它可不借减数分裂而导致低频率基因重组并产生重组子）
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53.什么是基因工程？操作过程分哪几步骤？
答：又称遗传工程，是指人们利用分子生物学的理论和技术，自觉设计、操纵、
改造和重建细胞的遗传核心---基因组，从而使生物体的遗传性状发生定向变异，以最大限度地满足人类活动的需要。 操作步骤：1）目的基因的取得 2）优良载体的选择
3）目的基因与载体DNA 的体外重组 4）重组载体导入受体细胞 5）重组受体细胞的筛选和鉴定
6)“工程菌”或“工程细胞”的大规模培养
54.如何防止衰退？ 答：1）控制传代次数
2）创造良好的培养条件 3）利用不易衰退的细胞传代 4)采用有效的菌种保藏方法
55.衰退的菌种如何复壮？
答：答：衰退的菌种有以下三种方式复壮：1.纯种分离法 2通过宿主体内复壮 3.
淘汰已衰退的个体。
56.试述菌种保藏的原理及常用保藏方法。（最简便的，最有效的）
答：菌种保藏的目的：在一定时间内使菌种不死、不变、不乱，以供研究.生产、交换之用。原理;首先应挑选典型菌种的优良品种，最好保藏他们的分生孢子、芽孢等休眠体；其次，还要创造一个有利于他们长期休眠的良好环境条件，诸如干燥、低温、缺氧、避光、缺乏营养以及添加保护剂或酸度中和剂等。最后，干燥和低温是菌种保藏中的作重要的因素。
保藏方法：冷冻干燥保藏法；液氮超低温保藏法；
57.为什么说土壤是微生物的天然培养基？
答：因为土壤具备了各种微生物生长发育所需要的营养、水分、空气、渗透压和温度等条件，所以成了微生物生活的良好环境，即微生物的天然培养基！？
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58.土壤中主要有哪些微生物类群？数量分布情况如何？
答：细菌、放线菌、霉菌、酵母菌、藻类、原生动物等(p239)。在每克耕作层土大致呈：细菌>放线菌>霉菌>酵母菌>藻类>原生动物。每亩耕作层土：细菌75kg、霉菌150kg、酵母菌7.5kg、藻类7.5kg、原生动物15kg。
59.我国饮用水标准中规定，自来水中细菌总数不得高于多少？大肠菌群数不得超过多少？
答：自来水中细菌总数应<100个/mL,大肠菌群数不得超过3个/L.
60.什么是正常菌群？试分析肠道正常菌群与人体的关系？
答：生活在健康动物各部位，数量大，种类较稳定，一般能发挥有益作用的微生物群，称为正常菌群。 正常菌群与人体的关系：互生。
生物拮抗作用；刺激免疫应答；合成维生素，降解食物残渣。
61.在微生物的生物环境中存在着几种关系？掌握概念，举例说明。
答：（1）互生：两种可单独生活的生物，当它们在一起时，通过各自的代谢活动而有利于对方，或偏利于一方的相互关系，称为互生。这是一种“可分可合，合比分好”的松散的相互关系。例如人体肠道中正常菌群与人的互生，好氧性自生固氮菌与纤维素分解菌的互生等。
（2）共生：指两种生物共居在一起，相互分工合作，相依为命，甚至形成独特结构，达到难分难解，合二为一的极其紧密的一种相互关系。例如根瘤菌与植物的共生，瘤胃微生物与反刍动物的共生等。
（3）拮抗：指由某种生物所产生的特定代谢产物可抑制它种生物的生长发育甚至杀死它们的一种相互关系。例如制作泡菜和牲畜青贮饲料的过程就存在拮抗作用。
（4）寄生：一般指一种小型生物生活在另一种较大型生物的体内（包括细胞体）或体表，从中夺取营养并进行生长繁殖，同时使后者蒙受损害甚至被杀死的一种相互关系。
（5）捕食：一般指一种大型的生物直接捕捉，吞食另一种小型生物以满足其营养需要的相互关系。
62.试述微生物在碳、氮循环中的作用。
答：⑴微生物在碳素循环中的作用：
碳是构成各种生物体最基本的元素，是有机物和生物细胞的结构骨架，没有碳就没有生命。碳素循环包括：CO2的固定和CO2的再生。 ①微生物在CO2的固定中的作用： 一些光能自养微生物，如藻类、光合细菌和蓝细菌等可通过光合作用直接利用自然界中的CO2合成有机碳化物，进而转化为各种有机物；化能自养菌能利用
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化学能同化CO2微生物合成的有机物在数量和规模虽远不及绿色植物，但在一些特殊环境(如植物难以生存的水域)中具有相当重要的作用。（百度）
63.什么是富营养化？污水处理的原理及常用方法有哪些？ BOD5和COD的定义 答：富营养化是指水体中因氮、磷等元素含量过高而导致水体表面蓝细菌和藻类过度生长繁殖的现象。
BOD5是水体中有机物含量的一个间接指标。一般指1L污水或待测水样中所含的一部分易氧化的有机物，当微生物对其氧化、分解时，所消耗的水中溶解氧毫克数（其单位为mg/L）。BOD的测定条件一般规定在20℃下5昼夜，故常用BOD5（5日生化需氧量）符号表示。 COD是水体中有机物含量的一个简便的间接指标。指1L污水中所含的有机物在用强氧化剂将它氧化后，所消耗氧的毫克数（其单位为mg/L）。
64.什么是大肠菌群？
答：一群能在37℃，24h发酵乳糖产酸产气的G-，杆状，无芽孢，兼性厌氧的肠道细菌。
65.什么是免疫、类毒素、单克隆抗体、生物制品、疫苗？
答：免疫：机体识别和排除抗原性异物的一种保护性功能。 类毒素：用0.3%~0.4%甲醛溶液对外毒素进行脱毒处理，可获得失去毒性但仍保留其原有免疫原性（抗原性）的生物制品。
单克隆抗体：由一纯系淋巴细胞克隆经分化、增殖后的浆细胞所产生的单一成分、单一特异性的免疫球蛋白分子。
生物制品：在人工免疫中，可作为预防、治疗和诊断用的来自生物体的各种制剂。 疫苗：用于预防传染病的抗原制剂。
66.外毒素与内毒素有可不同？
答：外毒素是在病原细菌在生长过程中不断向外界环境分泌的一类毒性蛋白，内毒素在活细胞中不分泌到体外，仅在细胞死亡后自溶或人工裂解时才释放。外毒素毒性比内毒素毒性高。
67.决定传染结局的三因素是什么？ 68.什么是干扰素？其作用机制是什么？
69.什么是抗原？有何特性？决定抗原免疫原性因素有哪些？抗原特异性由什么来决定？ 70.什么是抗体？分几类？各有何特性？（IgG、M、A） 71.抗原与抗体反应的一般规律是什么？
答：①特异性②可逆性③定比性④阶段性⑤条件依赖性 72.什么是补体？有何特性？
答：补体是存在于正常人高等动物血清与中的一组非特异性血蛋白（主要成分是β球蛋白）。在免疫反应中，由于它具有能扩大和增强抗体的“补助”功能，故称补体。补体本质是一类
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酶原，能被任何抗原-抗体的复合物激活，激活后的补体就能参与破坏或清除已被抗体结合的抗原或细胞，发挥其溶胞作用、病毒灭活、促进吞噬细胞的吞噬和释放组胺等免疫功能。 73.什么是补体结合试验？其基本原理是什么？
答：一种有补体参与，并以绵羊红细胞和溶血素（红细胞的特异抗体）是否发生溶血放映作为指示的一种高灵敏度的抗原与抗体结合反应
①补体可与任何抗体和抗原复合物相结合； ②指示系统（由绵羊红细胞和溶血素组成）遇未被抗原核抗体复合物所结合的游离补体（豚鼠的新鲜血清）时，就会发生肉眼可见的溶血反应。
74.微生物分类学有哪几项具体任务？ 答：分类、鉴定、命名 75.什么是学名？双名法？答：
76.什么是菌株？它如何表示？答：
77.何谓三域学说？提出此学说的根据是什么？答：
78.用于微生物鉴定的经典指标有哪些？ DNA碱基比例的测定 79.微生物分类鉴定中的现代方法有哪些？ 核酸分子杂交法 ①通过核酸分析鉴定微生物遗传型 rRNA寡核苷酸编目分析
微生物全基因组序列的测定
细胞壁的化学成分 全细胞水解液的糖型 ②细胞化学成分用作鉴定指标 磷酸类脂成分的分析 枝菌酸的分析 醌类的分析
气相色谱技术用于微生物鉴定 ③数值分类法 80.熟记下列一些最基本的微生物学名或属名：
Bacillus subtilis [枯草芽孢杆菌]， Escherichia coli [大肠杆菌] Bacillus thuringiensis [苏云金芽孢杆菌]，Staphylococcus aureus[金黄色葡萄球菌] Halobacterium [盐杆菌属]， Streptomyces griseus [灰色链霉菌]
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Saccharomyces cerevisiae [酿酒酵母]， Aspergillus flavus [黄曲霉]
Aspergillus niger [黑曲霉]， Penicillium chrysogenum [产黄青霉] Rhizopus oryzae [米根霉]
81.掌握从土壤中分离某类微生物的方法 模式题：例：从土壤中分离产生放线菌
①采集土样（去除肥沃土壤的表层土，取离地面5-20cm土层）； ②土壤稀释液的制备（10倍梯度稀释法）； ③高氏1号培养基的制备； ④倒平板；
⑤取适当稀释的土壤稀释液涂布到高氏1号平板上； ⑥于28℃的培养箱中培养5-6天；
⑦根据放线菌的菌落特征挑取放线菌菌落在平板或试管斜面上划线培养，并结合镜检确定是否为纯培养；
⑧利用打孔法将带有培养基的放线菌培养物接到涂有敏感菌的平板上，于培养箱中培养； ⑨根据是否有抑菌圈，确定该放线菌是否具有产生抗生素的能力；
⑩将能产生抗生素的放线菌接种到试管斜面上，培养好后于冰箱中保藏。 82.实验的原理、主要步骤、注意事项、成败的关键及思考题。（仅供参考，具体见自己的实验书和实验报告） 实验名称 培养基的制备 实验原理 P16细菌-牛肉膏蛋白胨（应用广泛的天然培养基）； 放线菌-高氏1号； 真菌-马丁氏培养基 平板分离法主要有：①平板划线分离法， ；②稀释涂布平板法（有效分离纯化微生物，测定样品中活菌数量） 平板菌落计数法是将待测菌落经适当稀释，涂布在平板上，经过培养后在平板上形成肉眼可见的菌落。 注意事项 蛋白胨很易吸湿，在称取时动作要迅速 成败的关键 思考题 P20 平板分离技术与活菌计数 稀释涂布平板法： 菌悬液细胞密度适宜； 涂布均匀，培养后菌落在整个平板表面分布均匀。 平板划线分离法：快速，接种环在平板上迅速滑动； 平行线之间的距离小，使划线次数增加； 及时灼烧接种环15
P34
上剩余的菌体
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普通光学显微镜的使用及微生物形态的观察 显微镜直接计数和悬滴观察法 在显微镜的光学系统中，物镜的性能最为关键，它直接影响着显微镜的分辨率。其中，油镜的放大倍数最大，使用时，需在载玻片和镜头之间加滴镜油（即香柏油）（作用：增加透光强度，增加分辨率）。 最小可分辨距离=不可将高倍镜先用低倍镜搜寻、聚焦样品，P转动经过加有确定待观察目标的大致位置47 镜油的区域； 后再转换到高倍镜或油镜 二甲苯等清洁剂会对镜头造成损伤，不要使用过量的清洁剂或让其在镜头上停留时间过长或有残留； 不要用手或其他纸擦拭镜头，以免使镜头粘上汗渍、油污或产生划痕，影响观察。 2NANAnsin 显微计数法的优点：直接、快速、操作简单，缺点：所测的结果通常是死菌体和活菌体的总和，且难以对运动性强的活菌进行计数； 计数时，通常数5个中方格的总菌数，设5个中方格中的总菌数为A,菌液稀释倍数为B(取100)，则：1mL菌液中的总菌数中，B取100) 4A2510B(其5用接种环在培养下面上刮取时动作要轻，不要将琼脂培养基一起刮起； 计数板上的计数室的刻度非常精细，清洗时切勿使用刷子等硬物，也不可用酒精灯火焰烘烤计数板； 取样时先要摇匀菌液，加样时计数室不可有气泡产生。 活细胞是透明的，因此在显微计数或悬滴法观察时均应适当减低视野亮度，以增大反差； 进行显微计数时应先在低倍镜下寻找大方格的位置，找到计数室后将其移至视野中央，再换高倍镜观察和计数 P56 细菌的制片及简单
对个体较小的细菌进行制片时采用涂片法； 利用单一染料对菌体进行染色的方法为简单染色法； 常用的微生物细胞染料都是盐，分碱性染料和酸性染料，前者包括美蓝（亚甲蓝）、结晶紫、碱性复红及孔雀绿等，后者包括酸性复红及刚果红选用活跃生长期菌种染色，老龄的G+会被染成红色而造成假阳性； 涂片不宜过厚，以免脱色不完全造成假阳性； 脱色过度造成假阴性。 P75、76、817
那等。通常用碱性染料进行简单染色，染因为微生物细胞在碱性、中性及弱酸色 性溶液中通常带负电荷，而染料电离后染色部分带正电荷，很容易与细胞结合使其着色；当细胞处于酸性条件下所带正电荷增加时，可采用酸性染料着色； 革兰氏染色法可将细菌分成G+ 和G— 两种类型，这是由这两种细菌细胞壁结构和组成的差异所决定的。G+—细胞壁肽聚糖含量高，G细胞壁肽聚糖含量低。 放线菌和霉菌的制片及形态观察 环境因素对微生物生长的影响 IMViC
4 放线菌制片时，不采用涂片法，以免破坏细胞及菌丝体形态。通常采用插片法或玻璃纸法并结合菌丝体简单染色进行观察。 对霉菌可以采取直接制片和透明胶带法观察。 在印片过程中，用力要轻，无 且不要错动，染色水洗时水流要缓，以免破坏孢子形态。 在直接制片法观察中，用镊子取菌和用解剖针分散菌丝时要细心，尽量减少菌丝断裂及形态被破坏，盖盖玻片时避免气泡产生。 物理、化学、生物及营养等不同环境因素影响微生物生长繁殖的机制不尽相同，而不同类型微生物对同一环境因素的适应能力也有差别。 低浓度染料可抑制细菌生长，G+ 比—G 对染料更加敏感 制备平板厚度均匀，滤纸片形状大小一致，不要在培养基表面拖动滤纸片，避免消毒剂不均匀扩散。 涂布平板要均匀，使细菌均匀分散。 消毒剂名称标记清楚，避免混乱。 P97 IMViC是吲哚，甲基红，伏-普和柠檬酸盐4个实验的缩写。 吲哚实验：大肠杆菌反应阳性，产气肠杆菌为阴性。 甲基红实验中，甲基红试剂不要加太多，以免出现加阳性。 P120 18
实甲基红实验：大肠杆菌为阴性，产气验 肠杆菌为阴性。 伏-普实验：产气肠杆菌为阳性，大肠杆菌为阴性。 硫化氢实验： （柠檬酸实验：产气肠杆菌为阳性，大肠杆菌为阴性。）（未做）
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