切片制作方法

LB 氯化钠0.5 蛋白胨1 酵母0.5 琼脂1.4

病例切片：

1. 取材，固定

取材---苦味酸固定12h---修改---换固定夜12h---修块---固定6-8h---流水冲洗过夜小于24h

2.脱水

70%新酒精 2h

80%或85%旧酒精 12h左右 可停

90%新酒精 2h

95%新酒精 0.5h

100%新酒精 3次 0.5h

3.透明

二甲苯新 10-50min 10min一次换液 第二次10min直接取

观察透明即可取出

4.淋蜡

软蜡 3h 52度 可停

液蜡 30min 60度

包埋

5.染色

二甲苯脱蜡 1 2 3 至少20min

复水 100酒精 1 2 3 10min一次

95% 90% 80% 70%酒精10min一次，滴干

苏木精10min

入盆，自来水淋洗3次，入0.5-1.0%的HCLL淋1-2次，自来水清洗

入1的氨水下淋1-2次，自来水淋洗3次，滴干

70% 80% 90%酒精 10min一次

醇伊红 7-10min

95%酒精洗样复色

100%酒精 1 2 3

二甲苯透明 1 2 3 4，0.5-1h，第4次可大于1h

制片，注明标签

6.药品，器具的准备

玻片：新玻片---清洗液（硫酸，高锰酸钾）浸泡24h以上---自来水冲洗干净---95酒精浸泡24h以上---擦干，备用

蜡： 软蜡 46-48度 48-52度 硬蜡 58-62度

反复熬制，加热，快速冷却，5次以上

酒精 二甲苯 木墩 包埋框

蛋白甘油（现配现用）：取蛋清充分搅拌20min以上与甘油1：1混合，纱布过滤，4度保存

苏木精：1液：苏木精1g乘2 无水酒精10ml乘2

2液：钾铵明矾20g乘2 蒸馏水200ml乘2

先将1用玻璃棒使苏木精溶解，再将2煮沸溶化去水，再加入1，再去水，即加入氯化汞约0.5g，再煮沸，迅速冷却后加入冰乙酸8ml，过滤使用

醇伊红：95酒精配成1%伊红溶液

1%氨水 0.5-1%HCL

注意事项：

切片4-5nm，玻片干净，不能有纤维

样品太多时，入硬蜡时要有梯度

染色时，切片前中后各一张

酒精脱水时可在80-85%中过夜