一、考试说明要求
光学显微镜操作技术， 生物体内物质的分离、鉴定技术， 微生物的培养与利用，调查，生物学研究中的科学思想和一般方法
二、必修本实验归纳
（一）、显微观察类实验：（光学显微镜操作技术）
1、显微镜的使用：取镜→安放→对光→压片→观察→收放。 （1）低倍镜使用：（观察任何标本都必须先用低倍镜，且标本应透明）
（2）高倍镜使用：先使用低倍镜确定目标→移动装片，使目标位于视野中央→转动转换器，换用高倍镜→调焦（转动细准焦螺旋）(视野较暗,可调反光镜或光圈)
2、显微镜使用注意事项：
（1）成像特点：放大倒立的虚像。
（2）放大倍数计算：物镜的放大倍数×目镱的放大倍数。
放大倍数指的是物体的长或宽。
（3）物像的移动方向与装片的移动方向相反。
（4）低倍镜下成像特点：物像小、细胞数目多、视野亮。 高倍镜下成像特点：物像大、细胞数目少、视野暗。
（5）放大倍数的判断方法：
目镜：镜头长放大倍数小，镜头短放大倍数大。
物镜：镜头长放大倍数大，镜头短放大倍数小。
物镜与装片之间的距离：距离近放大倍数大，距离远放大倍数小。
（6）低倍镜使用过程中，下降镜筒时必须双眼侧视镜筒，防止镜头撞到玻片。低倍镜找到物像后，换上高倍镜时，观察过程中只能使用细准焦螺旋。 3、制作临时装片： （1）用镊子从洋葱鳞片叶内侧撕取一小块透明薄膜──内表皮。 （2）把撕下的内表皮浸入载玻片上的水滴中，用镊子把它展平。
（3）用镊子夹起盖玻片，使它的一边先接触载玻片上的水滴，然后缓缓地放下，盖在要观察的材料上，这样才能避免盖玻片下面出现气泡而影响观察。
①图中A、B处的颜色分别是 。
②如果上述实验步骤二中从盖玻片的一侧滴入的是加有伊红（植物细胞不吸收的红色染料）的0.3g／mL的蔗糖溶液，则在显微镜下观察到A、B处颜色分别是 。 ③如果将上述实验步骤二中浸润在0.3g／mL的蔗糖溶液中的藓类小叶的装片，放在80℃条件下处理一段时间（装片中的藓类小叶保持在0.3g／mL的蔗糖溶液中）。在显微镜下清晰地观察到细胞结构后，为更准确地判断A处颜色，对显微镜的操作方法是 、 。如果A处呈绿色，可能的原因是 。
例题（2）：（2008江苏卷，生物，29）在完成了观察洋葱根尖分生区细胞有丝分裂实验后，教
师给学生提供了2份资料。
资料一：一份“实验报告”的部分内容
（一）解离：剪取洋葱根尖5cm，放入盛有质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒
精混合液（体积比为1:1）的玻璃皿中，在室温下解离3～5min。
（二）染色：把根尖放在盛有0.01g/mL龙胆紫溶液的玻璃皿中染色3～5cm。 （三）漂洗：将根尖放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10min。
（四）制片：将根尖放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子把根尖弄碎，盖上载玻片，用
拇指轻轻按压载坡片„„
资料二：全班20个实验小组的实验数据汇总表（注：各小组计数50个细胞，实验条件与观察计数方法相同）
分 裂 期 细胞周期 间 期 前期 中期 后期和末期 实验小组1计数细胞个数 43 4 1 2 实验小组2计数细胞个数 44 3 0 3 „„ „„ „„ „„ „„ 全班计数细胞个数 880 67 18 85 计数细胞总数 1 000 各时期细胞数的百分比 88.0 6.7 1.8 3.5 （1）请改正“资料一”中的3处错误： ① ② ③
（2）若已知洋葱根尖分生区细胞的细胞周期为12.0h，请根据“资料二”，在下面画一饼状图并表示出间期、前期、中期以及后期和末期所占的时间（单位：h，精确到小数点后一位）。
（3）有些因素会影响细胞周期各时期的长短，实验过程中也会产生一些误差。因而对整个实验结果可能产生影响的有_____ ______。
4、例题（1）：（2009江苏卷，理综，30）回答下列与细胞有关的实验问题。
（1）下列4项实验中，需保持细胞生理活性的有 （填序号）。 ①观察叶绿体和原生质的流动
②观察洋葱鳞片叶内表皮细胞中DNA的分布 ③探究酵母菌的呼吸方式
④红细胞中血红蛋白的提取和分离 （2）按下面步骤进行质壁分离实验。
步骤一：在洁净的载玻片中央加一滴清水，取一片藓类小叶，盖上盖玻片。
步骤二：从盖玻片一侧滴入0.3g／mL的蔗糖溶液，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。这样重复几次，使盖玻片下面的藓类小叶浸润在0.3g／mL的蔗糖溶液中。 步骤三：在显微镜下观察，结果如图所示。
学案编号4 日期 2010年3月
顺义二中2010届高三第二轮复习 学 案 专题二 高中生物实验设计部分 心在哪里，成功在哪里！
取成熟到第X天和第Y天的等量香蕉果肉，分别加等量的蒸馏水制成提取液，然后在a、b试管（二）、物质的分离、鉴定类实验：
中各加5mL第X天的提取液，在c、d试管中各加5mL第Y天的提取液。如图B
1、基本做法：取材——研磨（加入某物质）——过滤。
（1）在a、c试管中各加入等量碘液后，a管呈蓝色，与a管相比c管的颜色更____________，
2、叶绿体中色素的提取与分离实验有关事项 两管中被检测的物质是____________，图A中标示这种物质含量变化趋势的曲线是____________。
（2）在b、d试管中加入等量的斐林试剂，煮沸后，b管呈砖红色，与b管相比d管的颜色更(1）色素分离和提取的原理经常考察，易混淆。
____________，两管中被检测的物质是____________，图A中表示这种物质含量变化趋势的曲线是(2）在研磨时加入碳酸钙的作用是防止色素被破坏，加入二氧化硅的作用是有助于研磨。
____________。
(3）画滤液细线时，用力要均匀，速度要适中。 （3）已知乙烯利能增加细胞内乙烯的含量。如果在第X天喷施乙烯利，从第X天开始，曲线I(4）研磨要迅速、充分。 将呈现出________________________（加快、减慢）下降的趋势，曲线II将呈现出
________________________（加快、减慢）上升的趋势。 a．因为丙酮容易挥发；
b．为了使叶绿体完全破裂．从而能提取较多的色素；
（三）、调查： c．叶绿素极不稳定，能被活细胞中的叶绿素酶水解而被破坏。
为使实验获得成功常选用一些容易调查的内容，如植物种群密度的调查选择容易辨别个体的双(5）制备滤纸条时，要将滤纸条的一端剪去两角,可以使色素在滤纸条上扩散均匀,
子叶植物，遗传病的调查选择发病率高的单基因遗传病等。 便于观察实验结果。
1、调查：关键做到随机取样 （6）放置滤纸时，滤液细线必须在层析液上面。
2、根据调查的生物对象特点确定具体调查方法。 3、物质的鉴定：一般原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜
（1） 样方法：（适于植物；活动力较弱、活动范围较小的动物种群密度调查） 色反应（鉴定前应预留部分样液做对照）。
方法 确定调查对象→选取样方→计数→计算种群密度 （1）物质的分离与鉴定: 几种物质鉴定的原理,方法,试剂,现象,
（根据调查对象划定调查样方的大小。调查乔木、灌木、草本植物的种群密度时，样方依次减小，
物质 试剂 现象 实验要求 22
如乔木的样方为100m，灌木为16 m，草本植物为1 m2。）
淀粉 如材料具有颜色需先脱色 （2）标志重捕法：（适于活动能力强、活动范围大的动物种群密度调查）
还原糖 新制 试剂,水浴加热 （3） 显微计数法：（研究细菌、真菌等微生物种群数量变化）
脂肪 显微镜观察 （4）取样器取样法：（研究调查土壤小动物类群丰富度）
蛋白质 先加A(NaOH),再加B( CuSO4) （5）实际调查法：调查人群中遗传病。调查人类遗传病时不能限定特定人群，且被调查人群足
DNA 够大等。
水浴加热
RNA 3、调查数据的处理常用统计法。
纤维素 例题： 跳虫、甲螨和线虫是土壤中的主要动物类群，对动植物的分解起重要作用。
（2）实验材料要求：
请回答：
物质分离：富含待分离的物质，且容易获得。
（1）由于跳虫和甲螨活动能力 ，身体 ，不适合用手直接捕捉，常 采用吸虫器等进
物质鉴定：除了富含被鉴定的物质外，材料本身还要颜色浅（颜色深会对鉴定时的颜色反应起
行采集。
掩盖作用，导致实验现象不明显）
(2)先要采集大量的跳虫用于实验室培养，最好选择下图中的吸虫器 ，理由是 。
若要采集大量的甲螨作为标本保存，最好选择吸虫器 ，理由是 。 例题：（2008全国卷II，理综，30）香蕉果实成熟过程中，果实中的贮藏物不断代谢转化，香蕉
逐渐变甜。图A中I、II两条曲线分别表示香蕉果实成熟过程中两种物质含量的变化趋势。请回答：
学案编号6 日期 2010年3月
顺义二中2010届高三第二轮复习 学 案 专题二 高中生物实验设计部分 心在哪里，成功在哪里！ （四）、探究类实验：（生物学研究中的科学思想和一般方法） 例题（2）：（2009广东卷，理综，31）
1、科学研究方法的基本步骤： 疫苗对预防传染病具有重要意义。为研制抗某种病毒的灭活病毒疫苗．研究人员设计实辘方案 通过观察 提出 设计并完成 分析数据 提出问题 假说 实 验 得出结论 2、实验设计的几个原则 （1）对照性原则：科学、合理的设置对照可以使实验方案简洁、明了，且使实验结论更有说服力。
一个实验通常分为实验组和对照组（控制组）。实验组是施加实验变量处理的被试组；对照组是不施加实验变量处理的对象组，两者对无关变量的影响是相等的，两组之间的差别，认为是来自实验变量的结果。
（2）单一变量原则
控制其他因素不变，而只改变其中某一实验变量，，观察它对实验结果的影响。
（3）平行重复原则 ：为了避免实验结果的偶然性，有时须对所做的实验进行足够次数重复，在实验设计中要充分考虑这一点。
（4）科学性原则 ：在实验设计前，必须有充分的科学依据，而不足凭空想象。 3、实验设计时的一般方法(操作步骤的四步曲)及表达:
（1）取材\\分组\\编号：取材时要注意数量和生理及发育状态相同;用具要“相同”等表达：如选择长势相同,大小相似的同种植物(材料)随机平均分为A\\B两组或甲\\乙两组. （2）相同处理和不同处理：
根据实验变量设计对照(注意单一因素不同,其他因素相同且最适)表达：如按实验要求分别对实验组和对照组进行处理(体现单一变量和等量原则)
（3）进一步的相同处理： 其他因素相同且最适的继续处理表达：如把两个组放在适宜\\相同的环境条件下培养一段时间. （4）检测\\观察\\统计\\比较:必须找出具体的观察和记录对象,观察\\记录\\统计\\比较实验数据和现象. 表达：观察和记录实验数据并作记录. 4、例题（1）：
（2004年北京理综）一种以地下茎繁殖为主的多年生野菊分别生长在海拔10m、500m、1000m的同一山坡上。在相应生长发育阶段，同一海拔的野菊株高无显著差异，但不同海拔的野菊株高随海拔的增高而显著变矮。为检验环境和遗传因素对野菊株高的影响，请完成以下实验设计。 （1） 实验处理：春天，将海拔500m、1000m处的野菊幼芽同时移栽于10m处。 （2） 实验对照：生长于 m处的野菊。
（3） 收集数据：第二年秋天 。 （4） 预测支持下列假设的实验结果：
假设一 野菊株高的变化只受环境因素的影响，实验结果是：移栽至10m处野菊株高 。
假设二 野菊株高的变化只受遗传因素的影响，实验结果是：移栽至10m处野菊株高 。
假设三 野菊株高的变化受遗传和环境因素的共同影响，实验结果是：移栽至10m处野菊株高 。
如下：( l ）制备疫苗
将纯化的某种病毒在特定的______________________中培养、增殖。收获病毒后用灭活剂杀死，但要确保灭活病毒的________________不被破坏且能被免疫细胞识别。这样得到的灭活病毒即为本实验所用的疫苗。
（2）用实验动物检测疫苗刺激机休产生抗体的能力
① 实验原理：通过接种疫苗，灭活病毒进人实验动物体内可刺激 B 细胞，使之增殖、分化形成效应 B 细胞（浆细胞）并产生相应的________________；当____________病毒再次人侵时，机体能产生更强的特异性免疫反应，包括_______________________________________。
② 实验过程：将健康的实验动物分成对照组和多个实验组，每组若干只动物。 对照组的处理：接种不含疫苗的接种物，一段时间后再_____________________。 实验组的处理：接种_____________________________。一段时间后再接种病毒。
为确定该疫苗的有效浓度，不同实验组动物需接种_______________________的疫苗。 ③分析实验结果：统计实验组和对照组动物的发病率、存活率·
若该疫苗可以刺激机体产生足够的抗体．则实验组比对照组发病率_______________，存活率____________。
例题（3）：（2009福建卷，理综，26）
右图表示的是测定保湿桶内温度变化实验装置。某研究小组以该装置探究酵母菌在不同条件下呼吸作用的情况。材料用具：保温桶（500mL）、温度计活性干酵母、质量浓度0.1g/mL的葡萄糖溶液、棉花、石蜡油。
实验假设：酵母菌在有氧条件下呼吸作用比无氧条件下呼吸作用放出热量更多。
（1）取A、B两装置设计实验如下，请补充下表中内容：
装置 A B 方法步骤一 加入240ml的葡萄糖溶液 加入240ml煮沸后冷却的葡萄糖溶液 方法步骤二 加入10g活性干酵母 ② 方法步骤三 ① 加入石蜡油，铺满液面 （2）B装置葡萄糖溶液煮沸的主要目的是 ，这是控制实验的 变量。
（3）要测定B装置因呼吸作用引起的温度变化量，还需要增加一个装置C。请写出装置C的实验步骤： 装置 C 方法步骤一 ③ 方法步骤二 ④ 面 方法步骤三 加入石蜡油，铺满液（4）实验预期：在适宜条件下实验，30分钟后记录实验结果，若装置A、B、C温度大小关系是：
（用“<、=、>”表示），则假设成立。
学案编号6 日期 2010年3月
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