药代动力学参数测定

水杨酸钠血浆半衰期的测定 【目的和原理】

掌握用分光光度法测定水杨酸钠（sodium salicylate）的血药浓度,并学会用公式计算半衰期。

水杨酸钠在酸性环境中成为水杨酸（salicylic acid），与三氯化铁生成一种紫色络合物。该络合物在520nm波长下比色，其光密度与salicylic acid 浓度成正比。反应式为：

H

OOC

HO3- O + FeCl3Fe + 3H++3HCl 6 HOOC【实验对象】 家兔，体重2.5～3kg。 【实验器材和药品】 722分光光度计、离心机、50ml烧杯、effendorff管、加样器（1000μl）、试管、试管架、记号笔、兔手术台、手术器械一套、动脉插管、注射器（2ml、5ml、10ml）、BL-410生物机能实验系统。10%水杨酸钠，0.02%水杨酸钠标准液，10%三氯醋酸，10%三氯化铁，0.3%肝素生理盐水，1%普鲁卡因等。 【实验步骤和观察项目】 1. 取兔一只，称重，然后将其固定在兔手术台上。 2. 颈总动脉插管：用1%普鲁卡因在颈部正中局麻后，在气管上方将皮肤剪一纵向开口，用止血钳钝性分离皮下筋膜及肌肉组织，将气管暴露，在气管旁边可见较粗大的颈总动脉，将其与周围的组织分离，然后将充满肝素生理盐水的动脉插管插入，固定确切。由颈总动脉缓慢给入0.2%肝素生理盐水，1ml/kg，防止凝血。 3. 取试管5只编号，各管中加入10%三氯醋酸3.5ml。 4. 由颈总动脉放血2ml，分别放入1号管（对照管）和2号管（标准管）内各1.0ml,摇匀静置。 15. 由耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠，2ml/kg，给药后开始计时。

6. 给药后10min、25min、40min，先后取血1ml，分别置于3 、4、5号试管内，摇匀静置。

7. 以0.02%水杨酸钠标准液1ml放入2号管内，其余各管加入蒸馏水1ml，摇匀。

8. 将5支试管离心5分钟（2000转/分），精确吸取上清液3.0ml，分别放入另一编号的试管中，每管加10%三氯化铁0.5ml，摇匀显色。

9. 在分光光度计520nm波长下以1号管为对照管测定其余各管的光密度值。 10．由标准管的光密度值（Y）和浓度（X）求比值K，即K= X/Y，再根据X=K . Y，求得其余各管的浓度值，代入下式： 0.301 t1/2 =

式中X1、X2分别为血药浓度值，Δt为两次取血间隔时间，或将各时间点与其对应的水杨酸的浓度填入BL-410生物机能实验系统半衰期的统计表格，计算机将自动计算出t1/2。另外，t1/2也可用作图法求出，在半对数坐标纸上，以时间为横坐标，血浆药物浓度的对数值为纵坐标作出药-时曲线，在此曲线上找出血浆药物浓度下降一半所对应的时间即为该药的半衰期。 11.实验结果记录：

水杨酸钠血浆半衰期测定步骤及结果统计表

试管 10%三

氯醋酸

1号（对照管） 3.5ml 2号（标准管） 3.5ml

1.0ml 1.0ml 1.0ml 标准液

1.0ml

3号（10min） 3.5ml 4号（25min） 3.5ml

(lgX1-lgX2)/Δt 血 蒸馏水 10%三氯化铁

OD值

血药浓度

t1/2

充分摇匀离心5min取上

清

0.5ml

0.5ml

1.0ml 1.0ml 1.0ml 1.0ml

2

0.5ml

3.0ml 0.5ml

5号（40min） 3.5ml 【注意事项】

1.0ml 1.0ml 0.5ml

1.在各时间点从颈总动脉插管放血时，务必将插管前端含有肝素的血液弃掉不用。

2.每次加样时剂量一定要准确。 【思考题】

测定血浆半衰期有何临床意义？ 3

（李晶 赵丽娟）